响应面法优化微生物萃取转化制备L-苯基乙酰基甲醇的工艺
底物,活性剂,1材料,2方法与结果,3讨论
薛迎迎(连云港中医药高等职业技术学校中医药系,江苏连云港 222007)响应面法优化微生物萃取转化制备L-苯基乙酰基甲醇的工艺
薛迎迎*(连云港中医药高等职业技术学校中医药系,江苏连云港 222007)
目的:优化微生物萃取转化制备L-苯基乙酰基甲醇(L-PAC)的条件。方法:以啤酒酵母萃取制备L-PAC。采用高效液相色谱法测定L-PAC浓度。以L-PAC浓度为响应值,通过Box-Behnken响应面法对苯甲醛、曲拉通(Triton)X-100和葡萄糖用量这3个主要因素进行考察,同时进行验证试验。结果:苯甲醛和Triton X-100之间的交互作用最为显著,最优因素组合为苯甲醛1.1%、Triton X-100 0.14 g/m L、葡萄糖0.028 g/m L;验证试验中L-PAC的平均浓度为28.04mmol/L(RSD=1.35%,n=3),与预测值28.01 mmol/L的相对误差为0.11%。结论:利用响应面法对微生物萃取转化制备L-PAC的条件进行了优化,得到了各因素的最优组合,可为大批量转化制备L-PAC提供有利参考。
响应面法;微生物萃取转化;L-苯基乙酰基甲醇
麻黄是我国重要的中药资源之一,用于治疗风寒感冒、胸闷喘咳、风水浮肿、支气管哮喘等病症[1]。麻黄的主要有效成分是麻黄碱和伪麻黄碱。麻黄碱具有兴奋中枢神经、收缩毛细血管、增强心肌收缩力等功能。近年来,因滥采滥挖导致野生麻黄资源匿乏,使得麻黄碱产量不足,因此开发化学、生物等途径合成麻黄碱及伪麻黄碱的关键中间体L-苯基乙酰基甲醇(L-phenylacetylcarbinol,L-PAC)具有重要意义。
啤酒酵母在非离子表面活性剂曲拉通X-100(Triton X-100)溶液中具有较好的生物相容性[2],可用于在胶束溶液中经微生物萃取转化制备L-PAC。本文采用Box-Behnken响应面法,分析底物苯甲醛、表面活性剂Triton X-100和辅底物葡萄糖用量3个主要因素对L-PAC生成浓度的影响,以获取最优的转化条件,为大批量转化生产L-PAC提供有利参考。
1 材料
1.1 仪器
HZQ-Q全温振荡器(哈尔滨东联电子技术开发有限公司);Waters600高效液相色谱仪(HPLC),包括Waters 600泵、Waters 486紫外检测器和Waters PC 800工作站(美国Waters公司)。
1.2 菌种与试剂
啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)购于中国科学院微生物研究所;Triton X-100、L-PAC标准品(美国Sigma公司 ......
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