管晨峰，李玉珍，张开礼，李宗阳，黄国栋#(.中山大学附属第八医院药学部，广东深圳 58000；.深圳大学附属第一医院神经外科，广东深圳 58035)

    组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP109逆转胶质母细胞瘤U251细胞对替莫唑胺耐药性的机制研究

    管晨峰1*，李玉珍1，张开礼1，李宗阳2，黄国栋2#(1.中山大学附属第八医院药学部，广东深圳 518000；2.深圳大学附属第一医院神经外科，广东深圳 518035)

    目的：研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP109逆转胶质母细胞瘤U251细胞的耐药性机制。方法：建立对替莫唑胺(TMZ)耐药的TR/U251细胞，试验分为正常对照组、TMZ组(40 μmol/L)和TMZ(40 μmol/L)+RGFP109(0～120 μmol/L)不同浓度组，加入相应药物作用24 h后，CCK-8法检测细胞存活率，计算半数抑制浓度(IC50)。TUNEL法和Annexin V/PI法检测正常对照组、TMZ组和TMZ+RGFP109(42 μmol/L)组细胞的凋亡情况，免疫印迹法检测3组细胞中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、存活蛋白(Survivin)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤xL(Bcl-xL)蛋白表达，凝胶迁移实验检测3组细胞中p65乙酰化水平及其与κB-DNA的结合能力。结果：与正常对照组和TMZ组比较，TMZ+RGFP109不同浓度组细胞存活率明显降低(P<0.05)，且呈浓度依赖性。当RGFP109浓度为42 μmol/L时，TMZ对TR/U251细胞的敏感性与U251细胞相同。与正常对照组比较，TMZ组细胞中MGMT、Survivin、Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达均增强(P<0.01)，p65乙酰化水平无明显变化，但p65与κB-DNA的结合能力增强(P<0.01)。与TMZ组比较，TMZ+RGFP109组细胞中MGMT、Survivin、Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达均减弱(P<0.01)，p65乙酰化水平增强(P<0.01)，p65与κB-DNA的结合能力减弱(P<0.01)。结论：RGFP109可通过下调转录因子κB调节的抗凋亡蛋白表达，减弱p65与κB-DNA的结合来逆转U251细胞对TMZ耐药。

    组蛋白去乙酰化酶抑制剂RGFP109；转录因子κB；替莫唑胺；胶质母细胞瘤U251细胞；乙酰化

    胶质母细胞瘤是最常见的中枢神经系统(CNS)恶性肿瘤。烷化剂替莫唑胺(TMZ)是胶质母细胞瘤化疗的主要药物，但其耐药性很大程度上减弱了其化疗效果 ......