刘 芳，董改英，瞿晶田，柴士伟(天津中医药大学第一附属医院药学部，天津 300193)

    蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度优选及其对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响Δ

    刘 芳*，董改英，瞿晶田，柴士伟(天津中医药大学第一附属医院药学部，天津 300193)

    目的：优选蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度，并研究其对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响。方法：采用柱前衍生化反相高效液相色谱法，以煎煮1次后4种主要氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、L-羟脯氨酸和甘氨酸)的总煎出量为指标，对蕲蛇饮片及过1～8号筛部分进行筛选，优选蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度。将人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞分为阴性对照组、阳性对照组(1 μmol/L甲氨蝶呤)和最佳粉碎粒度蕲蛇煮散剂组(2.0 mg/mL)，分别作用48 h后，采用流式细胞术测定细胞凋亡率。结果：蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度为过6号筛，此时4种主要氨基酸总煎出量为(61.27±0.02)mg/g(n＝3)。与阴性对照组比较，最佳粉碎粒度蕲蛇煮散剂组细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，且略高于阳性对照组。结论：蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度为过6号筛；蕲蛇煮散剂具有诱导人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的作用。

    蕲蛇；煮散剂；粉碎粒度；人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞；凋亡

    蕲蛇为蝰科动物五步蛇[Agkistrodon acutus(Güenther)]的干燥体，性甘，味咸，有毒，归肝经，具有祛风、通络、止痉的功效，常用于治疗风湿顽痹、麻木拘挛、中风口眼?斜、半身不遂、搐痉挛、破伤风、麻风、疥癣等疾病[1]。蕲蛇是我国传统名贵中药材之一，药用资源短缺。因此，无论是从提高临床疗效，还是从节约资源的角度来讲，对其进行合理有效的利用都具有重要的意义。

    中药煮散剂是指将饮片粉碎成颗粒与水共同煎煮后，去渣取汁制成的液体剂型，是与传统汤剂相同的一种用药形式。采用煮散剂可以达到节约药材、提高汤剂煎煮质量等效果[2-3]。煮散剂的粉碎粒度影响着中药有效成分的煎出量，有效成分的煎出量会随着煮散剂粒度的变小呈现出先逐渐增高而后降低的趋势。本研究拟在传统中药煮散理论的指导下，以煎煮1次(临床常用煎煮方式)煎出的4种主要氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、L-羟脯氨酸和甘氨酸)的总煎出量为指标，对蕲蛇煮散剂的最佳粉碎粒度进行优选。并在此基础之上，应用流式细胞技术，以细胞凋亡率为指标，评价最佳粉碎粒度蕲蛇煮散剂诱导人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的作用，初步揭示蕲蛇治疗类风湿性关节炎的作用机制。

    1 材料 ......