李晖，李文静，马荣，曹建华，韩志武(1.青岛大学药学院药理学系，山东青岛6601；.青岛市第三人民医院药学部，山东青岛 66040；3.青岛大学附属医院药学部，山东青岛 66003)

    大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制研究

    李晖1，2*，李文静2，马荣2，曹建华2，韩志武3#(1.青岛大学药学院药理学系，山东青岛266021；2.青岛市第三人民医院药学部，山东青岛 266040；3.青岛大学附属医院药学部，山东青岛 266003)

    目的：研究天然产物大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷(PG)对皮肤黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制。方法：以0、10、20、50 μg/mL的PG作用于A375细胞24、48、72 h后，采用CCK-8法测定细胞的存活率；以0(对照)、20、50 μg/mL的PG作用于A375细胞48 h后，通过流式细胞仪以膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡率；免疫印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的蛋白表达以及细胞色素C在线粒体内外的蛋白表达；以0(对照)、5、10 μmol/L的PG作用于A375细胞48 h后，采用酶底物法测定细胞中Caspase-8、Caspase-9的活性。结果：PG能有效降低A375细胞的存活率；与对照比较，20、50 μg/mL的PG作用后细胞凋亡率明显升高(P<0.01)，细胞中Caspase-3、PARP及细胞基质中细胞色素C的蛋白表达均明显增强(P<0.05或P<0.01)，线粒体中细胞色素C蛋白表达明显减弱(P<0.05或P<0.01)；5、10 μmol/L的PG作用后细胞中Caspase-9活性明显增强(P<0.05或P<0.01)，Caspase-8活性无明显变化。结论：PG能抑制A375细胞活性、促进细胞凋亡；其是通过破坏线粒体膜电位、促进细胞色素C外流来发挥促凋亡作用的。

    大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷；皮肤黑色素瘤A375细胞；细胞凋亡；线粒体途径

    黑色素瘤一般指恶性黑色素瘤，来源于黑素细胞，多由黑素细胞所形成的痣或黑素斑发生恶变而来。近30年来，黑色素瘤的患病率和致死率正以每年4.1%的速度呈现显著上升趋势，已成为近年来所有恶性肿瘤中发病率增长最快的恶性肿瘤[1-3]。黑色素瘤极易转移致死，属于最难有效治疗的肿瘤之一。鉴于已转移的晚期黑色素瘤致死率极高，且其治疗方案相对有限，因此寻找安全有效的新型治疗手段抑制黑色素瘤是治疗关键 ......