蝉蜕蛋白的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究(4)
2.6 蝉蜕蛋白的体外抗氧化活性研究将最优条件下提取获得的提取液用盐酸调pH至蝉蜕蛋白的等电点(pH=5.8),然后以离心半径为9.5 cm、5 000 r/min离心10 min,纯净水洗涤沉淀2次,合并洗液,调溶液pH至中性,置于透析袋中,4 ℃透析48 h,冷冻干燥,纯净水复溶至所需质量浓度,对其进行体外抗氧化活性研究。
2.6.1 DPPH自由基清除能力测定 参照文献[20]方法,分别取2 mL不同质量浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL)的蝉蜕蛋白溶液和VC溶液于具塞刻度试管中,再分别加入2 mL DPPH溶液(用无水乙醇稀释制备成0.2 mmol/L),混合均匀,避光条件下室温反应30 min,于517 nm波长处测定溶液的吸光度,每个样品重复试验3次,取平均值,并计算DPPH自由基清除率:DPPH自由基清除率=[1-(As-A0)/Ac]×100%,其中,As为样品与DPPH混合液的吸光度,A0为样品与无水乙醇混合液的吸光度,Ac为纯净水与DPPH混合液的吸光度 ......
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