李慧艳 张超 张松 徐灏 刘洁 李菲 杨琦

    中圖分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)13-1754-06

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.13.07

    摘 要 目的：研究大黄素和黄芩苷联用对急性胰腺炎(AP)模型大鼠的改善作用和机制。方法：将70只大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄素组(250 mg/kg)、黄芩苷组(250 mg/kg)、奥曲肽组(阳性对照，10 μg/kg)、N-乙酰半胱氨酸组(阳性对照，180 mg/kg)和大黄素+黄芩苷组(125 mg/kg大黄素+125 mg/kg黄芩苷)，每组10只。除假手术组外，其余各组大鼠均复制AP模型，造模成功后静脉注射给予相应药物。在给药后3、6、12、24 h，测定各组大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶水平；在给药24 h后，检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)和胰腺组织中半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)水平，并采用Western blot法检测各组大鼠胰腺组织中蛋白激酶B(Akt)磷酸化和核因子E2相关因子2 (Nrf2)蛋白表达水平。另取40只大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄素+黄芩苷组(125 mg/kg大黄素+125 mg/kg黄芩苷)和大黄素+黄芩苷+LY294002(Akt特异性抑制剂)组(125 mg/kg大黄素+125 mg/kg黄芩苷+100 mg/kg LY294002)，每组10只，进行机制验证实验。同法造模、给药，24 h后检测大鼠胰腺组织中Akt磷酸化和Nrf2蛋白表达水平。结果：与假手术组比较，从给药后3 h开始，模型组大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶水平即显著升高(P98%)、大黄素标准品(批号：20151103，纯度：>98%)均购自西安赛德有机科技有限责任公司；牛磺胆酸钠(批号：86349，纯度：98%)、N-乙酰半胱氨酸(NAC，批号：A750，纯度：>99%)、Akt特异性抑制剂LY294002(批号：M2128，纯度：98%)均购自美国Sigma公司；醋酸奥曲肽注射液(瑞士诺华制药有限公司，批号：H20150948，规格：0.1 mg/mL)；SOD(批号：20170105)、丙二醛(MDA，批号：20170213)、谷胱甘肽(GSH，批号：20170122)、髓过氧化物酶(MPO，批号：20170204)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3，批号：20170123)测定试剂盒均购自南京建成生物有限公司；血清淀粉酶测定试剂盒(批号：20170315)、血清脂肪酶测定试剂盒(批号：20170311)均购自温州东欧公司；兔抗大鼠Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、Nrf2和β-肌动蛋白(β-actin)抗体均购自美国Cell Signaling Technology公司；羊抗兔二抗(武汉博士德生物科技有限公司) ......