董永红 彭雯 王耀华 张丽艳

    摘 要 目的：研究端錨聚合酶抑制剂XAV939对人骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖的抑制及其作用机制。方法：以人骨肉瘤SOSP-9607细胞为研究对象，采用CCK-8法测定0.5、1、5、10 μmol/L XAV939分别作用24、48、72 h后的细胞增殖情况，并计算细胞抑制率；采用流式细胞术检测5 μmol/L XAV939作用72 h后的细胞凋亡情况及周期分布；以甘油醛-3-硫酸脱氢酶(GAPDH)为内参，采用蛋白质印迹法测定0.5、1、5、10 μmol/L XAV939作用72 h后细胞中β-联蛋白(β-catenin)、G1/S期特异性周期蛋白D1(Cyclin D1)和基质金属蛋白酶7(MMP-7)的相对表达量。结果：1 μmol/L XAV939作用72 h后，5、10 μmol/L XAV939作用24、48、72 h后，SOSP-9607细胞的抑制率均显著升高(P99%)、十二烷基磺酸钠(批号：09/2016)、考马斯亮蓝G-250(批号：07/2016)、蛋白裂解液(批号：01/2017)、硝酸纤维素膜(批号：11/2016)均购自美国Sigma公司；RPMI-1640培养基(批号：20160924)、胎牛血清(批号：201702124)、L-谷氨酰胺(批号：20161109)、青霉素及链霉素(批号：20170117)、磷酸盐缓冲液[PBS，pH=7.4(下同)，批号：20170105]、胰蛋白酶(批号：20170209)均购自北京索莱宝生物科技有限公司；CCK-8检测试剂盒(上海碧云天生物技术研究所，批号：P0018)；膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin Ⅴ-FITC/PI)细胞凋亡检测试剂盒(含Annexin Ⅴ-FITC染料、PI染料、PBS，北京雷根生物技术有限公司，批号：DG0043)；Hoechst 33342/PI细胞凋亡检测试剂盒(含Hoechst 33342染料、PI染料、PBS，北京旷博生物技术有限公司，批号：RR013A)；蛋白质印迹法(Western blot)封闭缓冲液(pH=7.4，批号：HE209354)、羊抗兔二抗(批号：QE218426)均购自美国Thermo公司；甘油醛-3-硫酸脫氢酶(GAPDH)一抗(批号：SC-5364)、G1/S期特异性周期蛋白D1(Cyclin D1，批号：SC-5289)一抗、基质金属蛋白酶-7(MMP-7，批号：SC-785)一抗及β-catenin(批号：SC-6586)一抗均购自美国Santa Cruz公司；其余试剂均为分析纯 ......