马盼盼 叶军 杨艳芳 张星 王洪亮 刘玉玲

    摘 要 目的：建立可用于免疫調节剂长期(1个月)药效评价的大鼠免疫抑制长期模型并进行验证实验。方法：以Wistar大鼠为实验动物，以环磷酰胺(CTX)为诱导剂。将大鼠随机分为正常对照组、模型组和治疗组，每组5只。模型组大鼠以35 mg/kg的CTX连续腹腔注射3 d，之后以相同剂量每周腹腔注射1次进行加强诱导，共加强诱导3次，全程31 d；正常对照组大鼠不作任何处理；治疗组大鼠在模型组大鼠建模的基础上，于第3天建模后肌内注射胸腺五肽(TP5)注射液1 mg/kg，隔天注射1次至实验结束。观察整个实验周期内大鼠的精神状况和体质量变化，分别于第4、11、18、25、32天取血，测定外周血中CD4+/CD8+比值。实验结束后处死大鼠，测定其胸腺指数和脾指数。结果：与正常对照组比较，模型组大鼠精神状态较差，体质量增加较缓慢，各时间点的CD4+/CD8+比值和实验结束后的胸腺指数均明显降低，脾指数明显升高，差异均有统计学意义(P98%)；肝素钠(北京百灵威科技有限公司，批号：20070131，纯度：170 u/mg)。

    1.3 动物

    Wistar 大鼠，SPF级，♂，体质量170～190 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物生产许可证号为：SCXK(京) 2016-0011，动物合格证号：No.11400700- 209934。本动物实验通过中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所实验动物管理与动物福利委员会同意。

    2 方法

    2.1 分组

    大鼠于动物房适应性饲养2 d后，随机分为正常对照组、模型组和治疗组，每组5只。

    2.2 建模

    以35 mg/kg的剂量连续腹腔注射CTX 3 d，之后每周以相同剂量腹腔注射1次加强诱导，共加强诱导3次，建立免疫抑制长期模型。通过对比正常对照组和模型组的免疫水平，判断免疫抑制长期模型是否建立成功。此外，在建模基础上设立治疗组，于整个实验周期内多次给予TP5注射液，以期进一步考察免疫抑制长期模型大鼠经治疗后机体免疫水平的恢复情况，进而验证该模型是否可用于评价免疫调节剂的药效。

    2.3 给药方案

    正常对照组大鼠不作任何处理。模型组大鼠以建模第1天计，分别于第1、2、3、11、18、25天腹腔注射CTX，给药剂量为35 mg/kg。治疗组大鼠在模型组大鼠建模基础上，于建模第3天后开始肌内注射TP5注射液，给药剂量为1 mg/kg[4]，隔天注射1次至实验结束，共给药14次 ......