郑伟 海军 宋晓雪 常虎林 杜立学

    摘 要 目的：考察甲基蓮心碱对小鼠肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制。方法：将40只小鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和甲基莲心碱低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg)，每组8只。每天灌胃给药1次，连续给药7 d。给药结束后，除假手术组外，其余各组小鼠均采用夹闭肝蒂60 min后再灌注6 h复制肝I/R损伤模型。造模结束后，检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平，苏木精-伊红染色后观察肝组织病理学变化并进行炎症评分，检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA及核转录因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达情况。结果：与假手术组比较，模型组小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6以及肝组织中MDA、SOD、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高(P75%，计为4分。染色深浅应与背景着色对比，排除非特异性染色。最终免疫组化半定量得分=阳性细胞数目计分×染色程度评分。

    2.8 统计学方法

    采用GraphPad Prism software 6.0对实验数据进行处理。计量资料以x±s表示，多组样本间比较采用单因素方差分析，各组样本间的两两比较用SNK-q检验。P<0.05为差异有统计学意义。

    3 结果

    3.1 甲基莲心碱对肝I/R损伤小鼠血清中ALT、AST水平的影响

    與假手术组比较，其余各组小鼠血清中ALT、AST水平显著升高(P<0.05)；与模型组比较，甲基莲心碱各剂量组小鼠血清中ALT、AST水平均不同程度降低，其中甲基莲心碱中、高剂量组差异有统计学意义(P<0.05)；与甲基莲心碱低剂量组比较，甲基莲心碱高剂量组小鼠血清中ALT水平和甲基莲心碱中、高剂量组小鼠血清中AST水平显著降低(P<0.05)。各组小鼠血清中ALT、AST水平测定结果见表1。

    3.2 甲基莲心碱对肝I/R损伤小鼠肝组织病理形态学的影响

    小鼠肝I/R后整体成充血水肿状，表面暗黑淤血面积增大，红润面积减少；HE染色后显示，模型组小鼠肝组织内可见大量出血，间质组织大量炎性细胞浸润，大量片状的肝细胞坏死 ......