杨瑞 邸子真 吴怡 陶弘武

    摘 要 目的：建立測定气道炎症豚鼠血浆中白三烯B4(LTB4)浓度的方法，考察给予射干提取物后其对豚鼠血浆中LTB4浓度的影响，为阐明射干提取物抗炎止咳的作用机制提供参考。方法：将30只豚鼠随机分为空白组、模型组和射干提取物组，每组10只。除空白组外，其余2组豚鼠采用烟熏+合胞病毒滴鼻法制造气道炎症模型。造模结束后次日，射干提取物组豚鼠灌胃给药(10 mg/kg射干提取物，以野鸢尾黄素计)，空白组和模型组豚鼠灌胃等体积生理盐水，每天给药1次，连续给药7 d，末次给药后收集血浆样品。分别考察表面活性剂Triton X-114浓度、盐酸浓度、盐酸加入量、平衡温度和平衡时间对LTB4提取回收率的影响(以44.5 g/L的牛血清白蛋白生理盐水溶液替代空白血浆)，确定最优浊点萃取工艺进行生物样品处理。然后以吲哚美辛为内标，采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定血浆中LTB4浓度。色谱条件：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18，流动相为0.2%甲酸水-乙腈(40 ∶ 60，V/V)，流速为0.4 mL/min，柱温为40 ℃，进样量为5 μL；MS条件：电喷雾离子源，正离子模式下扫描，LTB4用于定量的离子为[M+H]+质荷比(m/z)335.219 4→195.099 8 ......