刘荷英 程奇珍 周敏 易巧

    摘 要 目的：建立測定马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质的方法，并对其杂质进行定性。方法：采用高效液相色谱法测定有关物质的含量，色谱柱为ACES C18，流动相为甲醇与4.32 g/L辛烷磺酸钠溶液(冰醋酸调pH至3.0)的混合溶液(50 ∶ 50，V/V)-甲醇(梯度洗脱)，流速为1.0 mL/min，检测波长为295 nm，柱温为30 ℃，进样量为20 μL。采用制备液相色谱法制备杂质纯品，色谱柱为YMC-PACK ODS-A，流动相为甲醇-0.01%三氟乙酸(40 ∶ 60，V/V)和甲醇-0.01%三氟乙酸(20 ∶ 80，V/V)，流速为8 mL/min，检测波长为295 nm，柱温为20 ℃，进样量为0.8 mL。采用液相色谱串联质谱法进行结构推测，色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18，流动相为甲醇-5 mmol/L甲酸铵溶液(含0.05%甲酸)(梯度洗脱)，流速为0.2 mL/min，柱温为20 ℃，进样量为2 μL；采用电喷雾离子源，以质谱全扫描模式检测母离子，以子离子扫描模式检测碎片离子。采用氢谱、碳谱进行结构确证和推测。结果：马来酸噻吗洛尔检测质量浓度线性范围为0.501～10.02 μg/mL(r=0.999 9)；定量限为3.012 ng，检出限为1.004 ng；精密度试验的RSD为0.2%，稳定性和重复性试验的RSD均小于5%。确证了杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的结构，并推测了杂质Ⅳ和Ⅴ的结构。结论：该方法快速、准确、专属性好，可用于马来酸噻吗洛尔滴眼液的质量控制。

    关键词 马来酸噻吗洛尔；有关物质；降解杂质；高效液相色谱法；制备液相色谱；液相色谱串联质谱法；氢谱；碳谱；测定；结构推测

    中图分类号 R927.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)16-2208-07

    ABSTRACT OBJECTIVE： To establish a method for the determination of related substances in Timolol maleate eye drops， and to conduct qualitative analysis of its degradation impurities. METHODS： HPLC method was adopted for determination of related substance. The determination was performed on ACES C18 column with mobile phase consisted of the mixed solution of methanol and 4.32 g/L sodium octane sulfonate (pH adjusted to 3.0 with glacial acetic acid)(50 ∶ 50 ......