张赟赟 杨海船 周萍 何春欢 严赟

    中圖分类号 R914.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)19-2667-04

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.19.17

    摘 要 目的：对壮瑶药材马蹄蕨的多糖成分进行提取分离纯化，并建立同时测定其中鼠李糖、果糖和D-无水葡萄糖3种单糖含量的方法。方法：优化水提醇沉法提取马蹄蕨多糖，比较不同型号大孔树脂除蛋白效果，并考察DEAE-52纤维素柱纯化所用不同洗脱液。采用高效液相色谱-蒸发光散射法进行含量测定。色谱柱为ZORBAX NH2，流动相为乙腈-水(72 ∶ 28，V/V)，流速为0.8 mL/min，柱温为40 ℃，进样量为10 μL。漂移管温度为50 ℃，载气流速为2.0 L/min，增益为1。结果：采用水提75%乙醇沉淀提取马蹄蕨粗多糖，D101大孔树脂除蛋白质，DEAE-52纤维素柱纯化，并依次用蒸馏水、0.2 mol/L NaCl、0.2 mol/L NaOH溶液进行洗脱，冷冻干燥，即得马蹄蕨多糖。鼠李糖、果糖和D-无水葡萄糖检测质量浓度线性范围分别为49.10～982.02、54.47～1 089.42、62.15～1 242.96 μg/mL(r≥0.999 6)；检测限分别为7.4、3.2、4.4 μg/mL，定量限分别为24.4、10.6、14.5 μg/mL；精密度、稳定性(15 h)试验的RSD均1.7，其他成分对待测成分的测定无干扰，理论板数以D-无水葡萄糖峰计>5 000，详见图1。

    2.2.4 线性关系考察 分别精密吸取“2.2.2(1)” 项下对照品溶液各0.5、1.0、2.0、3.0、5.0、10.0 mL ......