马丽月 曾诚 郑瑞芳 姜雯 何承辉 邢建国

    中圖分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)20-2805-06

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.20.15

    摘 要 目的：研究田蓟苷(TIL)对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织的保护作用。方法：120只雄性SD大鼠随机分为假手术组(0.9%氯化钠溶液)、模型组(0.9%氯化钠溶液)、尼莫地平组(32 mg/kg)和TIL低、中、高剂量组(4、8、16 mg/kg)，每组20只。灌胃相应药物，每天1次，连续7 d，末次给药15 min后，以改良线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型。进行大鼠神经功能缺损评分；计算大鼠脑梗死体积百分比；采用苏木精-伊红染色法观察大鼠脑组织病理形态学；检测大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量；采用Western blot法检测大鼠脑组织中降钙素基因相关肽(CGRP)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P7～13分者，并随机补充各组设计所需的大鼠数量。本实验建模成功率为50.73%。大鼠给药7 d后，进行第2次神经功能缺损评分。神经功能缺损评分细则见表1。

    2.4 大鼠脑梗死体积百分比的计算

    造模成功24 h后，大鼠腹腔注射1%水合氯醛(0.35 mL/kg)进行麻醉，而后处死，剥离脑组织，置于-20 ℃冰箱内急冻5 min后取出，放入脑槽中沿冠状面水平切7刀，取中间6片，每片厚约2 mm。将切片放入2%TTC染色液中，严格避光，置于37 ℃水浴箱中，每隔10 min摇动1次，30 min后取出。正常脑组织呈红色，梗死组织呈白色。将脑组织切片置于4%多聚甲醛溶液中固定24 h后取出，用图像分析系统计算大鼠脑组织的梗死体积、总体积并计算大鼠脑梗死体积百分比[11-12](大鼠脑梗死体积百分比=脑组织切片总梗死体积/脑组织切片总体积×100%)。

    2.5 大鼠脑组织病理形态学的观察

    造模成功24 h后，按“2.4”项下方法取脑组织，以10%中性甲醛溶液固定24 h后依次经水洗、脱水、透明、包埋。由切片机连续切取6 μm的冠状脑组织切片，经脱蜡、水化、染色(HE)、脱水、封片后，置于光学显微镜下随机选取5個视野观察大鼠脑组织病理形态学。

    2.6 大鼠脑组织中SOD、CAT、LDH活性和MDA含量的检测 ......