马春燕 张晓勇 丁桂凤

    中圖分类号 R714；R284.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2018)20-2836-04

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.20.22

    摘 要 目的：观察主动免疫联合地屈孕酮治疗复发性自然流产的疗效及对患者血清瘦素(LP)、脂联素(ADPN)水平的影响。方法：选择2015年11月-2016年11月济南市第三人民医院妇产科收治的103例复发性自然流产孕妇作为试验组，并按照入院先后顺序分为试验1组(n=51)和试验2组(n=52)；另选择100例正常妊娠孕妇作为对照组。试验1组受试者给予主动免疫联合地屈孕酮治疗，即提取患者配偶的淋巴细胞注射到患者皮下，每次间隔半个月，主动免疫3次为1个疗程；妊娠后给予地屈孕酮片10 mg，bid，服药至妊娠后3个月。试验2组患者给予地屈孕酮片10 mg，bid，服药至妊娠后3个月。比较入组时试验组与对照组的血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、LP、ADPN水平及治疗后两个试验组上述血清指标水平和妊娠结局(再次流产、足月妊娠、成功分娩率)。结果：入组时，试验组受试者的血清β-HCG、LP、ADPN水平均显著低于对照组；治疗后，试验1组的β-HCG、LP、ADPN水平，足月妊娠率及成功分娩率均显著高于试验2组，再次流产率显著低于试验2组(P0.05)，具有可比性。本研究方案经医院医学伦理委员会审核通过，受试者均知情同意并签署了知情同意书。

    1.3 试验组患者配偶淋巴细胞的提取

    提取试验组受试者配偶的淋巴细胞：抽取静脉血2 mL，去掉针头注入含有肝素的无菌试管中，摇匀，加入2 mL Hanks液进行稀释，混匀。用吸管吸取稀释后的血液沿试管壁缓缓加到含有2 mL淋巴细胞分离液的试管中，沿管壁流下的稀释后的血液叠加在分离液之上，并与分离液形成明显的界面。采用水平式离心，以2 000 r/min离心20 min，小心取出试管，用平口吸管小心吸取中层呈白色雾状的淋巴细胞层，用Hanks液洗涤2次，以1 500 r/min离心10 min，弃上清，加RPMI-1640培养液1 mL混匀，取少许进行细胞计数及活性测定。

    1.4 治疗方法

    试验1组受试者给予主动免疫联合地屈孕酮治疗：选用受试者配偶的2 mL血液，按“1.3”项下方法分离淋巴细胞，用0.9%氯化钠注射液稀释至2.0×107～3.0×107个/mL，抽取1.2 mL注射到受试者皮下，每次间隔半个月 ......