扈晓霞 韩世飞 李晶

    摘 要 目的：研究利莫那班对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的抑制作用及其机制。方法：取大鼠心肌细胞接种于6孔板中，密度调整为2×105 L-1，分为空白对照组、模型组、阳性对照组(氯沙坦10 μmol/L)和利莫那班低、中、高浓度组(0.1、1.0、5.0 μmol/L)，后5组加入0.1 μmol/L AngⅡ建立心肌肥大細胞模型，然后分别加入相应浓度的药物，培养24 h后，观察并测量每一个视野内球形细胞的直径和细胞数量，检测心肌细胞中Ca2+浓度、一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性和Ⅰ型大麻受体(CB1)蛋白表达情况。结果：各组心肌细胞数量差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较，模型组心肌细胞直径明显增大，心肌细胞中Ca2+浓度和CB1蛋白表达水平均明显增加，NO含量和NOS活性明显降低，差异均有统计学意义(P0.05). Compared with blank control group， the diameter of cardiomyocytes in model group increased， and Ca2+ concentration and protein expression of CB1 in cardiomyocytes were increased significantly； NO content and NOS activity decreased significantly， with statistical significance (P99%)均购自美国Sigma公司；氯沙坦钾胶囊(北京万生药业有限公司，批号：H20080015，规格：每粒50 mg)；小牛血清(批号：16010-159)和DMEM培养基(批號：11995-065)均购自美国Invitrogen Gibco公司；SYBR?GREEN PCR Master Mix(美国Applied Biosystem公司)；CB1基因引物与Ca2+荧光探针(上海吉凯基因化学技术有限公司)；生物素化抗鼠免疫球蛋白G(IgG)二抗(批号：TA319567)、辣根过氧化物酶(HRP，批号：HZB0173)、β-肌动蛋白(β-actin)抗体(批号：A5441)及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH，批号：TA309157)均购自北京中杉金桥生物技术公司；兔抗鼠CB1一抗(批号：A-AP19620c)、反转录试剂盒(批号：AK5602)均购自重庆卓诺生物技术有限公司；一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的测定试剂盒(上海酶联生物科技有限公司 ......