夏涛，王昌权，陈浩，郑林，巩仔鹏，李月婷，李勇军，黄勇，潘洁#

    (1.贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室，贵阳 550004；2.贵州医科大学药学院，贵阳 550004；3.民族药与中药开发应用教育部工程研究中心，贵阳 550004)

    白及为兰科植物白及[Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.]的干燥块茎，是2015年版《中国药典》(一部)收载的常用药材，具有收敛止血、消肿生肌的作用，可用于治疗咯血、外伤出血、疮疡肿毒、皮肤皲裂等病症[1-2]。目前，以白及为主药制备并上市的药品有白百抗痨颗粒、百贝益肺胶囊、结核丸等多个品种。本课题组前期研究发现，白及有效部位可通过促进血小板活化、形变、聚集、凝血来增加血液黏度，从而发挥止血作用[3-4]。Militarine为白及有效部位中含量较高的活性成分，其在白及药材中的含量达1.45%～3.32%[5-6]。药理研究证实，Militarine能改善慢性脑缺血模型大鼠的认知功能障碍，减轻其脑白质缺血性损伤，并具有舒张血管的作用[7-8]。由此可见，Militarine是一种具有药物开发前景的天然化学成分。

    药物代谢是药物在体内产生药效及毒性的主要过程，为筛选药物活性成分、降低药物研发过程中的高淘汰率，对候选化合物的代谢过程进行基础研究具有重要意义[9]。肝脏富含众多药物代谢酶，是药物代谢的主要场所[10]。肝微粒体是应用最为广泛的一个体外代谢模型，通过其获得的药物体外代谢特征可在一定程度上反映药物的体内代谢特性[11]。目前，关于Militarine的体内过程研究鲜见报道，其吸收、分布、代谢和排泄特征尚不明确。因此，本课题组采用肝微粒体体外孵育法对Militarine进行代谢研究，通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术对Militarine的代谢产物进行结构鉴定，推测其在肝微粒体中可能的代谢途径；并通过超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用技术考察Militarine在肝微粒体中代谢的酶促动力学特征，为该活性成分的代谢机制及在体药动学研究奠定基础。

    1 材料

    1.1 仪器

    UHPLC-QTOF型超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用仪(包括MassLynx V4.1质谱工作站、UNIFI数据库，美国Bruker公司)；Acquity UPLC I-Class/Xevo TQ-S型超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪(包括MassLynx V4.1质谱工作站，美国Waters公司)；KQ-300DE型数控超声波清洗器(四川沃特尔科技发展有限公司)；NA-5L型氮空一体机(北京中兴汇利科技发展有限公司)；TARGIN VX-Ⅲ型多管涡旋振荡器(北京踏锦科技有限公司)；HtPot70型恒温孵育箱(美国ABSON科学仪器集团)；Coulter Optima XPN-100型智能型超速离心机(美国Beckman公司)；ST40R型台式大容量冷冻离心机(美国Thermo Fisher公司) ......