门丽娇，刘亚迪，邱雨，袁旭江

    (广东药科大学新药研发中心，广州510006)

    N-反式对香豆酰酪氨酸[N-(E)-p-coumaroyltyrosine]为酚类氨基酸衍生物，最早被发现于非洲黑木树皮中[1]。随着研究的不断深入，至今发现含有该成分的植物还有可可[2]、山茱萸根[3]、阔叶野韭菜花和茎[4]、常春藤新鲜叶子[5]等。在生物活性方面，Osakabe N[6]通过实验动物模型研究了含有N-反式对香豆酰酪氨酸的可可提取液中粗多酚的生物活性，结果表明其对乙醇诱导的胃溃疡具有一定的保护作用，可抑制维生素E缺乏大鼠的氧化应激，降低高胆固醇血症模型兔的氧化敏感性，抑制小鼠皮肤的癌变，同时还可抑制杂环胺的致突变作用。Mokhtar M等[7]研究发现，辣椒多酚提取物具有抗菌和抗氧化活性，可降低癌细胞的活力，而N-反式对香豆酰酪氨酸是该提取物可能发挥生物活性的成分之一。抑制一氧化氮(NO)合酶介导的NO过表达可能是治疗包括神经炎性疾病在内的炎症性疾病的药物靶点。Hu XL等[8]利用酶活性和对接试验显示，N-反式对香豆酰酪氨酸对诱导型靶标产生的NO合酶有抑制作用。由此可见，N-反式对香豆酰酪氨酸具有多种生物活性，但其在植物纯化富集和分析方面的研究较少。笔者在前期研究中发现，鸡骨草叶中含有N-反式对香豆酰酪氨酸，且含量较高[9-10]。为此，本研究在建立测定鸡骨草叶中N-反式对香豆酰酪氨酸含量高效液相色谱法(HPLC)的基础上，采用单因素试验优化N-反式对香豆酰酪氨酸的纯化工艺，旨在为其开发利用和质量评价提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    1100型HPLC仪，包括二极管阵列检测器、真空脱气机、四元泵、自动进样器和柱温箱(美国Agilent公司)；BP211D型十万分之一电子天平(德国Sartorius公司)；JJ1000型千分之一电子天平(常熟市双杰测试仪器厂)；BHS-4型数显恒温水浴锅(江阴市保利科研器械有限公司)；RE-52AA型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。

    1.2 药品与试剂

    N-反式对香豆酰酪氨酸对照品(广东药科大学新药研发中心自制，批号:20180601，纯度:>99%)；聚酰胺树脂(100～200目，台州市路桥四甲生化塑料厂)；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为纯净水。

    1.3 药材

    24批鸡骨草叶药材(编号:S1～S24)经广东药科大学新药研发中心袁旭江副研究员鉴定分别为豆科(Leguminosae)植物相思子属(Abrus Adans.)的广州相思子(Abrus cantoniensisHance)或毛相思子(Abrus mollisHance)的干燥叶 ......