黄芪水提物对慢性肾功能衰竭模型大鼠的改善作用及其对MAPK信号通路的影响Δ
氧化应激,1材料,1仪器,2药材,药品与试剂,3动物,2方法,1黄芪水提物的制备,2分组,造模与给药,3样品的采集,4血清肾功能指标及炎症因子的检测,5氧化应激相关指标的检测,6凋亡相
汪卫红,许烨,李志明,远方(辽宁中医药大学附属医院肾内科,沈阳110032)
慢性肾功能衰竭(CRF)是由各种原发性或继发性肾脏疾病导致的肾功能不可逆性减退,甚至功能丧失,其中代谢产物潴留、电解质紊乱、酸碱平衡失调及内分泌异常等是各种肾脏疾病终末阶段的共同表现[1-2]。临床上主要采用透析、肾移植或相应的对症治疗(如静脉输注5%碳酸氢钠溶液纠正酸中毒、重组促人红细胞生成素纠正贫血或骨化三醇治疗肾性骨病等)等以缓解CRF症状,但上述治疗方案不良反应均较严重,且无法从本质上阻止CRF的进展[3]。大量研究表明,中医药疗法可改善肾功能并延缓CRF的进展,对CRF的治疗具有重要意义[4-6]。黄芪为豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao]或膜荚黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.]的干燥根,具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血等功效[7]。黄芪的主要成分为黄芪甲苷、黄芪多糖及多种类黄酮类化合物。现代药理研究表明,黄芪及其水提物具有抗氧化、抗凋亡等作用,可改善CRF并调节糖尿病肾病模型大鼠的肾功能,但其作用机制尚未见深入探讨[8-9]。有研究指出,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关调控蛋白p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)在CRF模型大鼠体内的磷酸化程度明显增高,且可加重其氧化应激及炎症反应,促进细胞凋亡[10],但黄芪对CRF模型大鼠的MAPK信号通路是否具有调节作用尚未见相关报道。为此,本研究通过建立CRF大鼠模型,探讨黄芪水提物对其氧化应激、炎症反应、细胞凋亡以及MAPK信号通路的影响,以期为黄芪的临床应用提供实验及理论依据。
1 材料
1.1 仪器
RM2235型石蜡切片机(德国Leica公司);BS-180型全自动生化分析仪、MR-96A型酶标仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司);UV-5600型紫外-可见分光光度计(上海元析仪器有限公司);7500型实时聚合酶链反应(Real-time PCR)仪(美国ABI公司);Mini-Sub Cell GT Cell型水平核酸电泳仪、Trans-Blot SD型半干式蛋白转膜仪、ChemiDoc MP型凝胶成像系统(美国Bio-Rad公司);5810R型离心机(德国Eppendorf公司)。
1.2 药材、药品与试剂 ......
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