刘霞，艾飞，褚春薇，陈向云，郭俊峰，杨毅，梅丽艳，苗纪飞，温泉，叶森，黎晖#(.贵州中医药大学基础医学院，贵阳 55005；.贵州中医药大学第二临床医学院，贵阳 55005；.广州中医药大学基础医学院，广州 50006)

    内毒素休克属于感染性休克，多因细菌细胞壁上的脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)导致，常伴随急性肺损伤，甚至多器官衰竭[1]。流行病学调查显示，约50%内毒素休克患者伴随急性肺损伤，甚至急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distress syndrome，ARDS)[2]。核转录因子κB(Nuclear factor κB，NF-κB)是炎症因子转录的核心，NF-κB信号通路的过度激活可使炎症发展成不可控状态，NF-κB信号通路活化的标志是P65、P50蛋白从细胞浆迁移至细胞核(该过程称为核转位)，从而启动下游炎症因子的转录，故抑制其核转位则可抑制过度的炎症反应[3-4]。

    感染性休克属中医外感病“厥脱”范畴，用扶阳固脱的参附注射液有确切疗效[5-7]。药理研究表明，参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺泡巨噬细胞表达的P65蛋白具有抑制作用[8]。但参附注射液是否能抑制内毒素休克模型大鼠肺组织中P65蛋白的核转位，目前尚未见报道。本实验通过建立内毒素休克模型大鼠，观察参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺组织炎症的改善作用，检测大鼠肺组织中P65、P50蛋白的表达和P65蛋白的核转位以及大鼠血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平，以期为参附注射液的临床应用提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    Neofuge 1600R台式高速冷冻离心机(力康生物医疗科技控股有限公司)；Ama 240高压灭菌锅(英国Astell公司)；EnSpire多功能酶标仪(美国PerkinElmer公司)；DHP-9012恒温培养箱(上海一恒科技有限公司)；PowerPac300电泳仪、170-3930转膜仪、CFX96荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)仪均购自美国Bio-Rad公司；5200全自动化学发光图像分析仪(上海天能科技有限公司)。

    1.2 药品与试剂

    LPS(美国Sigma公司，批号：20160920)；参附注射液(雅安三九药业有限公司，批号：20170324，规格：10 mL)；肝素(海通药业有限公司，批号：170212136)；地塞米松注射液(艾美捷科技有限公司，批号：100129-201704，规格：10 mg/mL)；甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)兔单克隆抗体(内参 ......