Box-Behnken设计-响应面法优化芡实中总维生素E的提取工艺研究Δ
无水乙醇,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1芡实中总维生素E的提取,2芡实中总维生素E的含量测定,3单因素试验筛选芡实中总维生素E提取工艺,4Box-Behnken设计-响应
王红,吴启南,崔永伟,伍城颖,沈蓓,樊修和(.南京市溧水区中医院药剂科,南京00;.南京中医药大学药学院,南京 003)芡实为睡莲科芡属一年水生草本植物芡(Euryale feroxSalisb.)的干燥成熟种仁,具有养血安神、益肾固精、补脾止泻、祛湿止带的功效[1-2]。在2007年,李美红等[3]从芡实中分离纯化了不同构型的生育酚(α、β、γ、δ-生育酚)类物质。生育酚又名维生素E,其中α-生育酚是自然界分布最为广泛、含量最多且活性最高的维生素E的存在形式[4],作为细胞内的抗氧化剂[5],其在促进性激素分泌、增强免疫功能、对抗自由基氧化等过程中扮演着重要的角色,同时也是芡实中医功效物质基础之一[6-7]。Box-Behnken设计-响应面法是一种优化工艺条件的有效方法,已被广泛地用于多因素的试验优化[8-11]。本文使用超声辅助法,以无水乙醇为提取剂,采用高效液相色谱法测定芡实中总维生素E的含量[12],通过单因素试验考察提取时间、提取次数、超声功率、粉碎度对芡实中总维生素E提取量的影响,再利用Box-Behnken设计-响应面法优化其提取工艺条件,为后续芡实脂溶性成分的功效与物质基础研究提供试验依据,也为芡实中总维生素E的资源开发与利用提供参考。
1 材料
1.1 仪器
Waters 2695高效液相色谱仪,配有高精度四元梯度泵、三极管阵列检测器(PDA)、Empower色谱工作站(美国Waters公司);KH300SP超声波提取设备(昆山禾创超声仪器有限公司);R-205旋转蒸发仪(瑞士步琪有限公司);SHZ-D(Ⅲ)循环式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂);BT125千分之一电子天平(德国赛多利斯科学仪器有限公司);SAGA-10TY实验室级超纯水器(南京易普易达科技发展有限公司)。
1.2 药品与试剂
芡实药材采自扬州高邮湖,经南京中医药大学吴启南教授鉴定为真品;α-生育酚(批号:120961,纯度:99%)、β-生育酚(批号:120894,纯度:99%)、δ-生育酚(批号:121052,纯度:99%)对照品均购自美国Sigma公司;抗坏血酸粉末(国药集团化学试剂有限公司,批号:F20100108,试验中防止维生素E氧化);甲醇为色谱纯,无水乙醇为分析纯,水为自制超纯水。
2 方法与结果
2.1 芡实中总维生素E的提取
参考相关文献方法[10],取干燥的芡实药材,打粉过80目筛;称取一定量的芡实粉末 ......
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