匡宇，赵永艳，何沛煜，张军银，周燕，彭腾#，余成浩(.成都中医药大学药学院/中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地/中药材标准化教育部重点实验室，成都 637；.成都中医药大学基础医学院，成都 637)

    三棱药材是指黑三棱科植物黑三棱(Sparganium stoloniferumBuch.-Ham.)的干燥块茎[1]，其性平、味苦，归肝、脾经，具有破血行气、消积止痛的功效，主治癥瘕痞块、痛经、瘀血经闭、胸痹心痛、食积胀痛等疾病。现代临床研究表明，三棱水煎液及其他炮制品具有抗血栓[2]、抗动脉粥样硬化[3]、抗炎镇痛[4]及改善脑缺血缺氧[5]等作用，三棱黄酮还具有抗肿瘤作用[6-7]。三棱化学成分复杂，结构多样，目前三棱中已知的化学成分按其结构分类主要有挥发油、苯丙素类、黄酮类和生物碱类等，此外，还含有少量蒽醌、甾体及其他类化学成分[8]。

    三棱中的黄酮成分是其重要有效成分之一[9]，已知三棱总黄酮类化合物有芒柄花素、山柰酚、四羟基黄酮醇-3-O-β-D-吡喃葡糖糖苷和异鼠李素-3-O-芸香糖苷[10-11]等成分。近年来，三棱被广泛地应用于妇科疾病的治疗中[12-13]。本课题组前期试验研究表明，三棱总黄酮对大鼠卵巢囊肿有一定的抑制作用[14]，因此，以三棱总黄酮为主要活性成分研究其治疗妇科疾病的效果，对提高其临床疗效和研究其作用机制具有重要意义；但试验过程中课题组发现三棱总黄酮在生药中含量过低，仅为生药量的0.1%～0.4%[15]。笔者在此基础上，以三棱总黄酮纯化率为考察指标，在单因素试验的基础上采用Box-Behnken设计-响应面法优化三棱总黄酮的纯化工艺，从而提高三棱总黄酮纯化率，为三棱药材的深入研究提供一定参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    BP211D电子天平(德国赛多利斯公司)；UV2600紫外-可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)；RE-2000B旋转蒸发仪(上海亚荣升华仪器厂)；BUJ25-12超声仪(昆山市超声仪器有限公司)；DZKW-4电子恒温水浴锅(北京中兴伟业仪器有限公司)；SHE-D循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限公司)。

    1.2 药品与试剂

    三棱药材(批号：20180214)于2018年2月购于荷花池药材市场，经成都中医药大学龙飞教授鉴定为Sparganium stoloniferumBuch.-Ham.的干燥块茎；芦丁对照品(中国食品药品检定研究院，批号：2T25-JYG5，纯度：91.9%)；大孔吸附树脂(型号：DM130、HPD100、X-5、NKA-9、AB-8、HP20、D101)均购自沧州市同轩商贸有限公司；硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、无水乙醇等为分析纯 ......