毛蕊异黄酮抑制肺腺癌细胞增殖和迁移的miR—21/PTEN信号通路机制研究(3)
取人肺腺癌细胞株SPC-A1适量,用含10%FBS的RPMI 1640培养基(以下简称“完全培养基”)于37 ℃ 、5%CO2培养箱(下同)中培养,每36 h更换1次培养基。待细胞融合至80%~90%时,用0.25%胰酶消化传代,选取对数生长期的细胞进行后续试验。2.3 CA对SPC-A1细胞存活率的影响
采用MTT法检测。取对数生长期细胞,以1×105个/mL的密度按100 μL/孔接种于96孔板中,培养过夜。将细胞随机分为正常对照组(加细胞,不加药物)和CA不同剂量组(5、15、25、50、75、100 μg/mL,剂量设置参考前期预试验结果),同时设置不加细胞和药物的空白对照组,每组设3个复孔。弃去培养基,空白对照组和正常对照组加入完全培养基100 μL,各给药组加入含相应药物的完全培养基100 μL,分别于培养12、24、48、72 h时弃去培养基;每孔加入MTT试剂10 μL,培养4 h后,弃去上清液;每孔加入DMSO 100 μL,置摇床中于室温下振摇15 min ......
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