毛蕊异黄酮抑制肺腺癌细胞增殖和迁移的miR—21/PTEN信号通路机制研究(4)
MMP-9蛋白表达的影响取对数生长期细胞,用0.25%胰酶消化后,以1 000 r/min离心5 min,收集细胞,用完全培养基重悬至2×105个/mL,按100 μL/孔接种于6孔板中,待细胞融合至80%,换无血清的RPMI 1640培养基继续培养16 h。将细胞随机分为正常对照组(不含药物,不转染,细胞正常生长)、miR-21 mimic组(不含药物,转染miR-21 mi- mic)、miR-21 mimic+CA组[CA 75 μg/mL(剂量设置参考“2.3”项下测得IC50值,下同),转染miR-21 mimic]、miR-21 inhibitor组(不含药物,转染miR-21 inhibitor)和miR-21 inhibitor+CA组(CA 75 μg/mL,转染miR-21 inhibitor),同时设置不加细胞和药物的空白对照组,每组设3个复孔。在转染前,取Lipofectamine 2000转染试剂5 μL,用Opti-MEM培养基250 ?L稀释至100 nmol/L ......
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