班玉娟，张丽，陈瑞，朱高峰，，王建塔，，陈文章，汤磊，，黄静#(.贵州医科大学药学院，贵阳550004；.贵州省化学合成药物研发利用工程技术研究中心，贵阳 550004)

    树豆酮酸A(Cajanonic acidA)是从树豆叶中分离出来的一种新的菧类化合物。已有体内和体外研究表明，树豆酮酸A具有降血糖活性[1]，可促进人肝癌细胞HepG2对葡萄糖的消耗[2]，可通过调节蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(Protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B)和相关胰岛素信号因子的表达来恢复胰岛素信号的转导，能有效降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖、血清总胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白胆固醇水平，能保护器官免受损伤[3]；此外，树豆酮酸A还可以抑制脂肪细胞分化并降低各种脂肪形成相关mRNA的基因水平[4]。由此可见，树豆酮酸A是一个潜在的可开发用于治疗2型糖尿病或肥胖症的药物。

    药物血浆蛋白结合率是指药物吸收后与血浆中所有蛋白结合的量占药物总量的百分比，是药动学的重要参数之一，药物与血浆蛋白的结合作用影响药物在体内的吸收、分布、代谢与排泄，从而影响其药理效应[5]。药物被吸收后，只有没有与血浆蛋白结合的游离药物才能通过生物膜并作用于靶器官发挥药理作用，因此测定药物与血浆蛋白的结合率在新药研发及临床研究中非常重要[6]。研究药物血浆蛋白结合率的方法有微透析法、平衡透析法、超滤法、超速离心法等[7]，本研究采用超滤法联合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法分别测定低、中、高3个质量浓度(2.5、5、20 μg/mL)的树豆酮酸A在大鼠、家兔及健康人血浆中的蛋白结合率，以期为树豆酮酸A的后期药效学、药理学和临床研究提供依据。树豆酮酸A的化学结构见图1。

    图1 树豆酮酸A的化学结构Fig1 Chemical structure of cajanonic acidA

    1 材料

    1.1 仪器

    Xevo G2-XS型UPLC-四级杆串联飞行时间质谱仪，配有MassLynx V4.1质谱工作站、UNIFI 7.0数据库(美国Waters公司)；Amicon Ultra-0.5型超滤离心管(美国Millipore公司，截留相对分子量：10 000)；pHS-3C型酸度计(上海雷磁仪器厂)；ThermoShaker R制冷型恒温混匀仪(北京昊诺斯科技有限公司)；JN300-2型氮气吹扫仪(苏州吉米诺仪器有限公司)；X1型高速离心机(香港基因有限公司)；FA805N型十万分之一电子天平(上海菁海仪器有限公司)；HH-2型数显恒温水浴锅[邦西仪器科技(上海)有限公司] ......