白屈菜碱对活化后大鼠肝星状细胞CFSC-8B的增殖、胶原合成及TGF-β1受体的影响Δ
增殖率,高浓度,1材料,1仪器,2药品与试剂,3细胞,2方法与结果,1CFSC-8B细胞的培养与分组,2CCK-8法检测细胞增殖,3酶消化法检测细胞上清液中Hyp含量,4E
李晓明,林鹏飞,董妙先,徐天娇,于春磊,荣华,王晓丽#(.齐齐哈尔医学院医药科学研究院,黑龙江齐齐哈尔 6006;.齐齐哈尔医学院药学院,黑龙江齐齐哈尔 6006)肝星状细胞(Hepatic stellate cells)是一种位于肝脏的非实质细胞,肝星状细胞的活化、增殖是肝纤维化发生过程中结缔组织异常增生、肝内细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)过度沉积的主要原因[1-2]。研究显示,肝纤维化发生后,若能经过积极的方法干预,抑制肝星状细胞的活化、增殖,肝纤维化的病理改变能发生可逆性恢复,从而避免肝纤维化进一步恶化为肝硬化,甚至肝癌[3-4]。因此,寻找一种能有效控制肝星状细胞活化、增殖的药物,对降低肝硬化和肝癌发病率具有重要意义。中药白屈菜为罂粟科白屈菜属多年生草本植物白屈菜(Chelidonium majusL.)的全草,花盛期割取地上部分,晒干或鲜用。其味苦,性凉,有毒,主要活性成分为白屈菜碱(Chelidonine)、原阿片碱、白屈菜红碱等生物碱,具有抗菌、镇痛、兴奋平滑肌作用,白屈菜治疗各种肿瘤在民间也广为流传,对多种肿瘤具有一定的抑制效果[5]。但关于白屈菜碱抑制肝纤维化的研究未见报道。笔者前期研究结果发现,白屈菜中活性成分白屈菜红碱可抑制肝纤维化小鼠的病理学改变[6],而白屈菜碱也是白屈菜中活性成分之一,因此,本文以转化生长因子β1(TGF-β1)活化大鼠肝星状细胞CFSC-8B为肝纤维化模型,观察白屈菜碱对TGF-β1活化后CFSC-8B的增殖和胶原合成的影响。
1 材料
1.1 仪器
UV-2550型紫外分光光度计、CKX41型倒置显微镜(日本Olympus公司);Countess C10227型细胞计数器(美国Invitrogen公司);3111型二氧化碳培养箱(美国Thermo公司);ELX800型全自动酶标仪(美国Bio-Tek公司);5417R型离心机(德国Eppendorf公司);Stratagene Mx3005P型实时定量聚合酶链式反应(PCR)仪(美国Agilent公司);HL-2000型分子杂交箱(美国UVP公司);JY-ZY2型转移电泳槽和JY-CZ1型单垂直电泳槽(北京君意东方电泳设备有限公司);SmartChemiⅡ型一体式微型化学发光成像仪(北京赛智创业科技有限公司);XPE504型分析天平(瑞士Mettler-Toledo公司)。
1.2 药品与试剂
白屈菜碱对照品(上海鼓臣生物技术有限公司 ......
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