究三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位的抗肿瘤作用研(3)
2.4 MTT法检测三脉菝葜提取物及其不同极性萃取部位的体外抗肿瘤活性取对数期生长期细胞,使用胰酶消化后用完全培养基调整混悬液中细胞密度为5×104 mL-1,按每孔100 μL的量将细胞悬液接种至96孔板中,板周围一圈加入100 μL磷酸盐缓冲液(PBS),以防止边缘效应。将细胞置于37 ℃、含5% CO2培养箱中培养24 h后,吸除上清液,加入相应的含药培养基。根据预试验结果,三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位分别设定5个给药质量浓度(均按浸膏量计):三脉菝葜醇提物和醇提物正丁醇萃取部位均为1 000、500、400、300、200 μg/mL,醇提物石油醚萃取部位为200、150、100、75、50 μg/mL,醇提物乙酸乙酯萃取部位为200、100、75、50、37.5 μg/mL,醇提物水层部位为2 000、1 500、1 000、500、250 μg/mL,每个质量浓度均设5个复孔,每孔加入含药培养基100 ?L。并另设立阳性药物(顺铂)对照(分别用完全培养基将顺铂制成质量浓度为16、4、1、0.25、0.062 5 μg/mL的溶液,每个质量浓度设5个复孔 ......
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