原阿片碱对人肝星状细胞HSC-LX2增殖的抑制作用及机制研究(3)
1.3 细胞HSC-LX2细胞购自美国Millipore公司。
2 方法
2.1 原阿片碱溶液的制备
用DMSO溶解原阿片碱,制成浓度为 100 mmol/L 的母溶液(现配现用),0.22 μm的微孔滤膜滤过除菌。
2.2 细胞培养
HSC-LX2细胞使用含有10%胎牛血清及100 u/mL 青霉素和100 μg /mL链霉素的1640高糖培养基于37 ℃、5%CO2培养箱中培养,每24 h换一次液,待细胞融合至80%~90%时传代培养,取对数生长期细胞用于试验。
2.3 MTT法检测HSC-LX2细胞的增殖抑制率
取对数生长期的HSC-LX2细胞,以0.2 %胰蛋白酶消化,以离心半径4 cm(下同)、1 000 r/min离心5 min,收集细胞,用含10%胎牛血清1640培养液混悬细胞,以5×104 mL-1的密度接种于96孔细胞培养板中 ......
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