桑椹花青素-3-葡萄糖苷对癫痫模型小鼠的保护作用及海马BDNF/TrkB通路的影响(2)
2 方法2.1 桑椹花青素-3-葡萄糖苷的提取
按文献方法[9]提取桑椹花青素-3-葡萄糖苷。将30g桑椹冷冻干燥后粉碎(30~80目),以0.1%盐酸一乙醇(40:60,V/V)为提取溶剂、固液比1:20(g/mL)、浸提温度50℃、浸提时间1.5h浸提2次,合并2次提取液,真空抽滤并浓缩得到粗浸膏(得率为11%)。使用AgilentLC 1200型高效液相色谱仪精制纯化花青素-3-葡萄糖苷,制备色谱柱为YMC Hydrosphere C18(150mm×4.6mm,5μm),纯化条件为0.04%三氟乙酸(A)-乙腈(B)(95:5,V/V),纯化时间为0.5h,流速为1mL/min,检测波长为254nm。最终制备得到纯度>99.5%的花青素-3-葡萄糖苷样品。用生理盐水将花青素-3-葡萄糖苷制成一定浓度的贮备液,高压灭菌后于-20℃冰箱中保存,备用。
2.2 分组、造模與给药
小鼠适应性饲养1周后随机分为正常组、模型组、单药组(桑椹花青素-3-葡萄糖苷)和激动剂联用组(桑椹花青素-3-葡萄糖苷+LM22B-10) ......
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