2.3 血浆中IL-6、TNF-α含量检测

    在灌洗前，于小鼠腹主动脉取血1 mL，置于肝素抗凝采血管中，摇匀，以1 000×g离心3 min，分离血浆。采用ELISA法以酶标仪检测各组小鼠血浆中IL-6、TNF-α的含量，严格按照相应试剂盒说明书操作。

    2.4 肺湿质量/干质量比值检测

    取血后，采用颈椎脱臼法处死各组小鼠，取其右肺上叶，称定湿质量(W);于80 ℃恒温干燥箱中烘烤约48 h至恒定质量，记为干质量(D);计算各组小鼠肺湿质量/干质量(W/D)比值。

    2.5 肺组织形态学观察

    采用HE染色法观察。称定肺质量后，取小鼠肺组织适量，置于4%多聚甲醛溶液中固定24 h，经常规石蜡包埋、切片(厚度约1～2 μm)后，以HE染色，并置于光学显微镜下观察肺组织的形态学特征。

    2.6 肺组织中TLR4、NF-κB蛋白相对表达量检测

    采用Western blotting法检测。取小鼠肺组织适量，用蛋白提取试剂盒提取肺组织蛋白，使用BCA法测定蛋白含量。煮沸10 min使蛋白变性 ......