2.4 各组大鼠脏器指数的检测

    各组雄性大鼠取血后，摘取其胸腺、睾丸、附睾、精囊腺、肾并称定质量，计算各脏器指数(脏器指数=脏器湿质量/体质量)。

    2.5 各组大鼠睾丸、附睾、肾组织病理学观察

    取“2.4”项下各组雄性大鼠的睾丸、附睾、肾组织适量，置于10%甲醛溶液中固定，脱水，石蜡包埋，切片(3～5 ?m)，然后进行苏木精-伊红(HE)染色，在显微镜下观察上述组织的病理学变化。

    2.6 各组大鼠肾组织中凋亡相关蛋白表达水平的检测

    采用免疫组织化学法检测。取“2.5”项下各组雄性大鼠的肾组织切片，进行脱蜡，水化，抗原修复，以10%山羊血清封闭抗原，加入Bax、Caspase-3单克隆抗体和Bcl-2、Caspase-9多克隆抗体(稀释比例分别为1 ∶ 250、 1 ∶ 250、1 ∶ 500、1 ∶ 250)，置于4 ℃条件下孵育18～24 h;以PBS洗涤2 min×3次，加入二抗(稀释比例为1 ∶ 2 000)，室温孵育10 min;以PBS洗涤10 min×2次 ......