2.4 柴胡桂枝汤挥发油对A549细胞体外增殖的抑制作用考察

    将处于对数生长期的A549细胞制备成5×104个/mL的单细胞悬液，以100 μL/孔接种于96孔培养板中(取2块培养板，分别用来考察顺铂和柴胡桂枝汤挥发油的体外增殖抑制作用)，将细胞置于37 ℃、5%CO2细胞培养箱中培养24 h待细胞贴壁后，弃上清，然后将细胞分为顺铂组、柴胡桂枝汤挥发油组(分别用1块板)，试验均设阴性对照组。顺铂组分别添加含10%FBS和不同质量浓度顺铂(4、8、16、32、64 mg/L，剂量参考文献[11]设置)的DMEM培养基，柴胡桂枝汤挥发油组分别添加含10%FBS和不同质量浓度挥发油(25、50、100、200、400 mg/L，以挥发油质量计，剂量由前期试验摸索得出)的DMEM培养基，阴性对照组仅加入含10%FBS和0.1%DMSO的DMEM培养基(记为0 mg/L组)，并另设不含细胞但加入含10%FBS和0.1%DMSO的DMEM培养基的空白对照组，每组均设置5个复孔。加药后，将各组细胞置于37 ℃、5%CO2细胞培养箱中培养48 h，再在每孔避光加入MTT溶液(5 mg/mL)10 μL，继续培养4 h，弃上清;每孔加入DMSO溶液150 μL ......