曹国琼 游珊丽 徐剑 张永萍

    摘 要 目的：建立化風丹药母的指纹图谱，并测定不同发酵时间样品中7种核苷类成分的含量。方法：采用高效液相色谱法(HPLC)，色谱柱为Pntulips BP-C18，流动相为甲醇-水(梯度洗脱)，流速为0.8 mL/min，检测波长为260 nm，柱温为35 ℃，进样量为10 μL。以黄嘌呤为参照，绘制12批化风丹药母的HPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价，确定共有峰;同法测定不同发酵时间(0、1、2、3、4周)样品中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷的含量。结果：12批化风丹药母共有8个共有峰，相似度为0.712～0.954;指认了7种成分，分别为尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷。不同发酵时间样品中上述7种成分检测质量浓度的线性范围分别为0.87～8.7 μg/mL(r=0.999 6)、1.51～15.1 μg/mL(r=0.999 7)、6.08～60.8 μg/mL(r=0.999 5)、1.52～15.2 μg/mL(r=0.999 6)、1.82～18.2 μg/mL(r=0.999 6)、1.48～14.8 μg/mL(r=0.999 6)、1.63～16.3 μg/mL(r=0.999 3);定量限分别为 0.027 4、0.076 3、0.250 4、0.172 3、0.101 1、0.078 3、0.084 2 μg/mL，检测限分别为0.008 7、0.025 5、0.007 9、0.084 1、0.035 7、0.026 9、0.027 5 μg/mL;精密度、重复性、稳定性(12 h)试验的RSD均小于3%;加样回收率分别为94.16%～100.16%(RSD=2.24%，n=6)，93.87%～100.65%(RSD=2.67% ......