陈瑞 周维 张丽 朱高峰 黄静 汤磊

    摘 要 目的：研究樹豆酮酸A对人肝微粒体中的5种细胞色素P450(CYP)酶的体外抑制作用。方法：采用Cocktail探针药物法，在人肝微粒体中加入50.0、15.0、5.0、1.5、0.5、0.15、0.05 μmol/L的树豆酮酸A，与混合探针药物[包含非那西丁、右美沙芬、奥美拉唑、睾酮、甲苯磺丁脲(分别为CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的探针药物)]共同孵育60 min。在另设空白组和阳性对照组[α-萘黄铜、奎尼丁、(+)-N-3-苄基香酚、酮康唑、磺胺苯吡唑(分别为CYP1A2、CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9的特异性抑制剂)]的基础上，以葛根素为内标，采用超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS)分析相应代谢产物(对乙酰氨基酚、右啡烷、5-羟基奥美拉唑、6β-羟基睾酮、羟基甲苯磺丁脲)的含量。以ACQUITY UPLC?BEH C18为色谱柱，以0.01%甲酸水溶液-0.01%甲酸乙腈为流动相(梯度洗脱)，柱温为40 ℃，流速为0.4 mL/min，进样量为2 μL;采用电喷雾电离源，以多反应监测模式进行正负离子扫描，数据采集范围为m/z 100～1 200，碰撞气为氩气，雾化气为氮气，锥孔气流量为50 L/h，脱溶剂气流量为800 L/h，正、负离子模式下毛细管电压分别为2.0、1.5 kV，离子源温度分别为120、110 ℃，脱溶剂的温度分别为400、450 ℃。使用Graphpad Prism 5.0软件进行非线性回归分析并计算半数抑制浓度(IC50)。结果：上述各代谢产物检测浓度的线性范围分别为0.26～8.35、0.36～34.56、0.10～3.09、3.67～117.37、0.15～4.88 μmol/L(R2>0.99) ......