谢蓬蓬 刘佳玥 曾蕾

    摘 要 目的：研究蒼附导痰丸含药血清调控大鼠卵巢颗粒细胞(GCs)自噬的作用。方法：将3月龄SD大鼠分为生理盐水组(生理盐水，灌胃)、卵巢刺激素(FSH)注射组(10.71 IU/kg，皮下注射)和苍附导痰丸高、中、低剂量灌胃组[0.5、1、2 mg/g(以生药量计)，灌胃]，每组6只，每天皮下注射/灌胃给药1次，连续3天;末次给药后，于腹主动脉采血，获取各组大鼠的含药血清。将大鼠GCs分为空白对照组、模型组、FSH组(阳性对照)和苍附导痰丸高、中、低剂量组，除空白对照组直接加入生理盐水组大鼠血清100 μL外，其余各组均先给予丙酸睾丸酮诱导以复制自噬模型，然后模型组加入生理盐水组大鼠血清100 μL，各给药组分别加入对应药物组含药血清100 μL。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞上清液中雌二醇(E2)、孕激素(P)的含量，采用Western blot法检测各组GCs中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白的相对表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组细胞中PI3K、Akt、mTOR和自噬相关因子Beclin 1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62 mRNA的相对表达量 ......