辛国松 张晶 李吉业 季宇彬 刘斌 李钧 陈鹰翔 于淼

    摘 要 目的：探讨石蒜碱诱导H22荷瘤小鼠体内肿瘤细胞凋亡的活性及其机制。方法：以昆明种小鼠为对象，通过前肢腋部皮下接种H22肝癌小鼠腹水构建小鼠实体瘤模型，将造模后的小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组(羟基喜树碱6 mg/kg)和石蒜碱低、中、高剂量组(10、20、40 mg/kg)，每组10只。阴性对照组小鼠灌胃等体积生理盐水，各给药组小鼠灌胃相应药物，每天1次，连续给药7天。末次给药后，检测小鼠的瘤体质量并计算抑瘤率。另通过腹腔注射H22肝癌小鼠腹水构建小鼠腹水瘤模型，同法分组、给药。末次给药后，记录小鼠的生存时间并计算生存延长率，采用流式细胞术检测小鼠肿瘤细胞的早期凋亡率;在设立正常对照组(未荷瘤正常小鼠)的基础上，采用荧光探针钙黄绿素乙酰甲酯染色法考察各组小鼠肿瘤细胞的线粒体膜通透性，采用Rhodamine 123染色法考察其线粒体电位变化，采用比色法和Western blot法分别检测其胱天蛋白酶3(Caspase-3)活性和凋亡相关蛋白[Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt-C)、Caspase-9]的表达情况。结果：与阴性对照组比较，阳性对照组和石蒜碱各剂量组小鼠瘤体质量均显著降低，生存时间均显著延长，肿瘤细胞的早期凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01);其抑瘤率分别为39.41%、23.36%、36.50%、56.93%，生命延长率分别为49.23%、29.09%、50.19%、69.08%。与正常对照组比较，阴性对照组小鼠肿瘤细胞线粒体膜通透性、Caspase-3蛋白活性以及Cyt-C、Caspase-9蛋白的表达水平均显著升高，线粒体膜电位、Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.05或P<0.01);与阴性对照组比较，各药物组小鼠肿瘤细胞线粒体膜通透性和Bcl-2/Bax比值均显著降低 ......