孙丽君 常福厚 白图雅 王玉华

    中圖分类号 R284.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2021)09-1089-04

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.09.11

    摘 要 目的：筛选山苦荬保肝活性部位并对其化学成分进行研究。方法：采用系统溶剂法，以70%乙醇对山苦荬药材进行提取，用不同溶剂对所得提取物进行萃取，分别得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇部位和剩余水部位。以对乙酰氨基酚诱导人肝细胞HL-7702复制肝损伤细胞模型，采用MTT法检测上述各部位(40 μg/mL，均以生药量计)对损伤细胞的保护作用并筛选活性部位。采用硅胶柱、葡聚糖凝胶柱色谱等分离手段对活性部位进行分离纯化，根据理化性质和波谱(氢谱、碳谱)数据鉴定化合物结构。结果：经山苦荬不同萃取部位作用后，各药物组细胞的存活率均较模型组显著升高(P0.05)，提示以5‰DMSO溶液溶解样品对细胞影响不大;与正常组比较，模型组细胞存活率显著降低(P正丁醇萃取部位组>乙酸乙酯萃取部位组>石油醚萃取部位组，提示山苦荬不同萃取部位对人肝细胞损伤均有一定的保护作用。

    2.3 山苦荬保肝活性部位化学成分的分离鉴定

    2.3.1 正丁醇萃取部位的分离纯化

    参考“2.2”项下结果，本课题组先针对活性较高、极性相对适中的正丁醇萃取部位进行化学成分分离，剩余水部位的化学成分研究尚在进行中(拟后续另文报道)。取正丁醇萃取物133 g，经DS-401大孔吸附树脂柱粗分离后，以水-甲醇(100 ∶ 0～0 ∶ 100，V/V)梯度洗脱，再经薄层色谱(TLC)鉴别后，得30%、50%、70%、90%甲醇和水洗脱物。各洗脱部位经反复硅胶柱色谱分离，以不同比例氯仿-甲醇-水进行洗脱，再借助Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱纯化、重结晶、TLC鉴别等方法 ......