陆晓华 金桂芳 余河汉 杨红

    中圖分类号 R322.81;R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2021)22-2748-07

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.22.11

    摘 要 目的：探讨细叶远志皂苷(TEN)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织线粒体自噬的影响。方法：将50只雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、TEN中剂量+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组[TEN 40 mg/(kg·d)+自噬抑制剂3-MA 30 mg/(kg·d)]和TEN低、中、高剂量组[20、40、80 mg/(kg·d)]，每组10只;另将10只同系野生型小鼠作为正常对照组。各给药组小鼠灌胃相应药液，正常对照组和模型组小鼠灌胃0.3%羧甲基纤维素钠溶液，每天给药1次，给药体积为0.01 mL/g，连续给药3个月。末次给药后，检测神经元内微管相关蛋白1轻链3(LC3)的阳性表达水平[以积分光密度(IOD)计]，脑组织线粒体中LC3、泛素结合蛋白p62、Cathepsin D、Rab7、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因诱导的假定激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶(Parkin) mRNA的表达量和LC3、p62、PINK1、Parkin蛋白的表达量。结果：与正常对照组比较，模型组小鼠神经元内LC3的IOD值和脑组织线粒体中LC3、p62、PINK1、Parkin mRNA及其蛋白的表达量均显著升高(P98%)购自大連美仑生物技术有限公司;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对照品(货号S2767，纯度99.97%)购自美国Selleck Chemicals公司;组织线粒体分离试剂盒(批号C3606)、苯甲基磺酰氟(PMSF)裂解液(批号ST505)、二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量分析试剂盒(批号P0010S)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试剂盒(批号P0012A)均购自上海碧云天生物技术有限公司;Trizol试剂购自宝生物工程(大连)有限公司;通用型显色试剂盒(小鼠/兔聚合物法检测系统)(批号PV-6000)、二氨基联苯胺(DAB)显色剂(批号ZLI-9019)、辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔免疫球蛋白G(IgG)二抗(供免疫组化用 ......