杨洋 李天发 王军 黄珊 凌学斌

    中图分类号 R965.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2022)05-0542-06

    DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.05.06

    摘 要 目的 探討类叶升麻苷调控Rho家族GTP酶3(Rnd3)/核因子κB(NF-κB)通路对缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞损伤的影响。方法 本实验将H9c2心肌细胞分为对照组(不给药、不造模)、H/R组(仅造模)、H/R+AS-L组、H/R+AS-M组、H/R+AS-H组(以上3组先分别给予10、30、90 μmol/L类叶升麻苷，再造模)、H/R+pcDNA组[先转染pcDNA(空载体)，再造模]、H/R+pcDNA-Rnd3组[先转染pcDNA-Rnd3(Rnd3过表达载体)使Rnd3过表达，再造模]、H/R+AS-H+si-NC组[先转染si-NC(阴性对照)，然后给予90? μmol/L类叶升麻苷，再造模]、H/R+AS-H+si-Rnd3组[先转染si-Rnd3(Rnd3小分子干扰RNA)抑制Rnd3过表达，然后给予90 μmol/L类叶升麻苷，再造模]。各组经相应处理后，检测细胞凋亡率和细胞中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、白细胞介素1β(IL-1β)水平、IL-6水平、Rnd3和NF-κB亚基p65(NF-κB p65) mRNA及蛋白的表达、活化胱天蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)和Cleaved Caspase-9蛋白表达的变化。结果 给予不同浓度类叶升麻苷均可降低H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平、LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平，升高SOD活性和Rnd3 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05)，且呈剂量依赖性。Rnd3过表达可使H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率，NF-κB p65、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平，LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低，使Rnd3蛋白表达水平和SOD活性升高(P<0.05);而抑制Rnd3过表达，可减弱类叶升麻苷对H/R诱导H9c2心肌细胞的凋亡、氧化应激及炎症反应的抑制作用(P<0.05)。结论 类叶升麻苷可通过促进Rnd3表达、抑制NF-κB p65表达来调控Rnd3/NF-κB通路 ......