吴红雁，顾亚琴，周红成，陈 欣，张立虎(江苏医药职业学院医药生物技术研究院，江苏盐城 224005)

    肝纤维化(hepatic fibrosis，HF)是由多种原因致慢性肝损害所引发的病理改变，任何肝脏损伤在肝脏修复愈合的过程中都存在纤维化的过程；如果损伤因素长期存在，纤维化的过程将长期持续，最终可能会发展为肝硬化[1]。肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSCs)主要位于肝脏的狄氏腔内，正常情况下处于静止状态；在外界损伤刺激下，HSCs将被激活，其活化和快速增殖被普遍认为是HF形成的中心环节，因此现阶段研究将HSCs作为HF疾病治疗的关键靶标[2]。有研究表明，在肝损伤过程中，活化的HSCs 受到HF 微环境的影响，其能量代谢方式将发生转变，由氧化磷酸化供能途径转变为糖酵解途径，后者具有葡萄糖摄取率高、糖酵解活跃、代谢产物乳酸(lactic acid，LD)含量高的优势[3]。这样的能量代谢方式能为HSCs持续供能，有利于其持续活化，从而推动HF的不断进展[3]。可见，HSCs糖酵解在HF中具有重要作用，抑制糖酵解途径可抑制HSCs 增殖、阻断HSCs 向肌成纤维细胞转化、抑制并改善HF，可作为治疗HF 的潜在策略。

    黄芪初载于《神农本草经》，味甘，性微温，“主痈疽，久败疮，排脓止痛，大风癞疾，五痔，鼠瘘，补虚，小儿百病”[4]。作为一种补益中药，黄芪被广泛应用于临床治疗及日常保健。环黄芪醇(cycloastragenol，CAG)是从黄芪中分离出的一种次生代谢产物，是由黄芪药理活性成分黄芪甲苷经水解而得。与黄芪甲苷相比，CAG的脂溶性更强，更容易通过细胞膜而被吸收入体[5]。近年来研究表明，CAG具有广泛的药理作用，如抗衰老、抗炎、减轻脑损伤、抑制肺纤维化、抗抑郁等[6]。此外有研究指出，黄芪、黄芪甲苷有抗HF的作用，CAG能有效改善非酒精性脂肪性肝病[7]，还能抑制阿霉素致小鼠肝脏脂质过氧化物水平的升高[8]。同时亦有证据表明，CAG可通过激活糖代谢相关受体(如法尼醇X 受体)来显著降低高脂饮食所致的肝脏脂质堆积，从而改善肝脏脂肪病变[7]。由此可见，CAG可能通过调控能量代谢过程来发挥肝脏保护作用。基于此，本研究拟采用四氯化碳(CCl4)诱导的HF 小鼠模型来探究CAG 对其HF 及糖酵解的影响，旨在为阐释该成分抗HF作用(尤其是通过影响糖酵解过程来发挥能量代谢调控作用)的机制提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    SpectraMax型多功能酶标仪购自美谷分子仪器(上海)有限公司；Ⅸ53 型光学显微镜购自日本Olympus 公司；RM2235 型石蜡切片机购自德国Leica 公司；5424R型台式高速冷冻离心机购自德国Eppendorf 公司；YD-6D 型组织包埋机、YD-A 型组织摊片机、YD-B 型组织烤片机均购自金华市科迪仪器设备有限公司；YP502N型电子天平购自上海菁海仪器有限公司 ......