秦百君，唐曦平，杨昕，杨蕾，冯敏超，张驰，洪晓华，蓝艳梅，陈国忠(1.广西中医药大学第一附属医院脾胃科，南宁 500；.广西中医药大学第一临床医学院，南宁 50001；.广西医科大学附属肿瘤医院胰腺内科，南宁 5001；.仁寿县中医院内科，四川 眉山 60500)

    重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)是由胰蛋白酶异常激活、炎症因子大量释放入血而引发的胰腺水肿坏死及胰周组织液积聚。该病可并发肠梗阻、胃肠功能衰竭等疾病，严重者会出现全身炎症反应综合征和多器官功能障碍等急危重症[1]。SAP在亚洲国家的发病率为0.036%～0.125%，病死率为6.5%～26%，且进展迅速，预后凶险[2-3]。肠道是SAP早期受损的功能器官之一，生理状态下，肠道菌群与肠黏膜屏障相互作用，共同维持肠道稳态并促进组织代谢、调节免疫等；疾病状态下，肠道屏障功能障碍及肠道菌群失衡是SAP的重要病理机制之一，菌群的结构、相对丰度、位置变化均可能破坏肠黏膜屏障的完整性，从而进一步诱发菌群移位，加重炎症水平，损害靶器官[4-5]。因此，在SAP早期修复肠黏膜屏障功能，并及时抑制菌群移位，对降低全身炎症水平、遏制病情进展具有重要意义。清解化攻方(Qingjie huagong decoction，QJHGD)是广西中医药大学第一附属医院脾胃科治疗SAP的院内制剂，临床应用多年，已获国家发明专利(专利号ZL201811021893.2)。本课题组前期研究表明，QJHGD联合化学药治疗早期SAP的临床疗效较好，可抑制炎症因子表达，降低胰腺组织坏死程度，保护肠黏膜屏障，但具体机制未完全阐明[6-8]。

    本研究采用雨蛙素联合脂多糖腹腔注射法复制SAP大鼠模型，采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunoadsordent assay，ELISA)法和Western blot法观察QJHGD对SAP模型大鼠炎症水平及肠黏膜屏障调节蛋白的影响；并基于16S rRNA高通量测序，初步探究该药对SAP模型大鼠肠黏膜屏障的保护作用及调节肠道菌群、修复肠黏膜屏障的分子机制。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有Centrifuge5804R型离心机(德国Eppendorf公司)，CKX41型倒置相差显微镜(日本Olympus公司)，RM2016型病理切片机(德国Leica公司)，Thermo HistoStar型组织包埋机(江苏维林科生物技术有限公司)，Qubit 3.0 Fluromete型荧光定量仪、Multiskan GO型全波长酶标仪(美国Thermo Fisher Scientific公司) ......