宋忠军，朱晓青，何艳，李勇军，陆苑(1.贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室，贵阳 550004；2.贵州医科大学药学院，贵阳 550004；.贵州医科大学附属医院临床试验研究中心，贵阳 550004；4.贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心，贵阳 550004)

    银杏叶提取物是从银杏叶中提取的以黄酮类、萜内酯类等化合物为主要活性成分的天然药物[1]。研究表明，银杏叶提取物具有抗氧化、抗肿瘤、保护神经系统等药理作用，被广泛应用于心血管系统、神经系统、呼吸系统疾病和肿瘤的辅助治疗[1]。银杏黄酮苷元(ginkgo flavone aglycone，GA)是借助酶水解法除去银杏叶提取物中黄酮苷的糖基所获得的新型提取物，主要成分为槲皮素、山柰酚和异鼠李素[2]。与传统的银杏叶提取物相比，GA具有更高的生物利用度和更强的生物活性[3]。多柔比星(doxorubicin，DOX)又称阿霉素，是临床治疗肝癌、淋巴瘤、乳腺癌等恶性肿瘤的一线化疗药物，但该药具有明显的心脏毒性、肾毒性、骨髓抑制等毒副作用(尤以心脏毒性最为严重)，且在治疗过程中易诱发多药耐药，已成为目前肿瘤临床治疗难以克服的瓶颈[4-5]。

    中药对化疗药物的增效减毒作用是肿瘤治疗研究的热点之一[6]。相关研究表明，中药的介入可明显减少化疗药物所致不良反应，提高化疗有效率，改善肿瘤患者的生存质量[7]。有研究表明，在肿瘤治疗过程中，DOX的多药耐药性主要由P糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)介导，而DOX与P-gp抑制剂联合使用可增强DOX的抗肿瘤活性[8]。此外，DOX所致氧化损伤是其引发心脏毒性的主要原因[9]，而槲皮素、山柰酚和异鼠李素均具有抗肿瘤、抗氧化和保护心脑血管系统等多种药理活性[10-13]，且三者都是P-gp抑制剂[14]。基于此，本课题组推测GA对DOX具有一定的增效减毒作用，故本研究以H22荷瘤小鼠为对象，初步探讨GA的增效减毒作用，旨在为银杏资源的深度开发利用及临床抗肝癌联合用药方案的选择提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括680型酶标仪(美国Bio-Rad公司)、800DH型CO2细胞培养箱(美国Thermo Fisher Scientific公司)、Eclipse E100型正置光学显微镜(日本Nikon公司)等。

    1.2 主要药品与试剂

    GA(槲皮素、山柰酚、异鼠李素含量分别为44.61%、44.23%、4.77%)由贵州省生化工程中心何珺副教授惠赠；盐酸多柔比星原料药(批号N1111A ......