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编号:458278
苗药了哥王提取物对斑马鱼的毒性作用Δ
http://www.100md.com 2022年10月31日 中国药房 2022年第20期
培养液,1材料,1主要仪器,2主要药品与试剂,3实验动物,2方法,1斑马鱼胚胎培养液的配制,2了哥王提取物的制备,3了哥王提取物药液的配制,4了哥王提取物对斑马鱼胚胎发育的影响,5了哥王提取物对斑马鱼的急性毒性作用,6了哥
     何正艳,冯 果,郑传奇,李 玮,刘 文,朱光林,王文静,苏红梅,宋学丽,张 菊(.贵州中医药大学药学院,贵阳 550025;2.国家苗药工程技术研究中心,贵阳 550025)

    了哥王始载于《岭南采药录》,来源于瑞香科植物南岭荛花Wikstroemia indica(Linn.)C. A. Mey.的根及根皮,是贵州地区常用苗药之一。了哥王味苦、微辛,性寒,有毒,归肺、肝经,具有清热解毒、消肿散结、止痛的功效,常用于瘰疬、痈肿、跌打损伤、急性扁桃体炎、慢性支气管炎、乳腺癌、恶性淋巴癌、肺癌等疾病的临床治疗[1-5]。现代研究发现,了哥王具有抗肿瘤、镇痛、抗菌、抗炎、镇咳袪痰等药理作用[6-7]。该药疗效确切,临床应用价值和市场潜力较大,但因毒性作用较强,使得其进一步开发和利用受限。《生草药性备要》《湖南药物志》中均有了哥王“大毒”或“有毒”的毒性记载[8-9]。目前,国内外有关了哥王的毒性研究大多基于大鼠和小鼠模型[10-12],具有成本高、周期长、不便于观察等缺点。斑马鱼作为一种新的模式生物,其幼鱼及胚胎通体透明,且繁殖率高、生长发育周期短,加之其与人类基因的相似度高达87%,故在筛选和评价药物毒性方面具有独特优势[13]。基于此,本文拟利用斑马鱼模型,探讨了哥王提取物对斑马鱼胚胎、斑马鱼的毒性作用,以期为其毒性的深入研究提供实验参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有MULTISKAN SKY 1530型全自动酶标仪[赛默飞世尔科技(中国)有限公司]、SMZ18型体视荧光显微镜(日本Nikon公司)、CKX53型倒置相差显微镜(上海蛮吉光电科技有限公司)、PCO-1500型立体显微镜及成像系统(武汉鑫力钧生物科技有限公司)、ESENAWS1型斑马鱼养殖系统(北京爱生科技发展有限公司)、SLI700型生化培养箱(天津信睿生物科技有限公司)等。

    1.2 主要药品与试剂

    了哥王药材购自广西壮族自治区玉林市玉州区玉林银丰国际中药港,经贵州中医药大学药学院李玮教授鉴定为瑞香科荛花属植物了哥王W. indica(Linn.)C.A.Mey.的干燥根或根皮。

    吖啶橙(批号325E043)、油红O染液(批号20190910)、PBS(批号20190517)、DMSO(批号821D0311)均购自北京索莱宝科技有限公司;4%多聚甲醛(批号190620)购自上海尚宝生物科技有限公司;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase ......

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