覃 乐，陈 勇，黄桂东，吴瑞胜，刘代华，周至品#(.广西中医药大学药学院，南宁 53000；.广西医科大学附属柳州市人民医院药学部/广西壮族自治区卫生健康委员会广西临床疾病生物技术研究重点实验室/柳州市胃肠道中成药工程技术研究中心，广西柳州 545006)

    三叶香茶菜Isodon ternifolius(D.Don)Kudo 为唇形科植物，又名细叶香茶菜，常用于治疗黄疸、风湿肿痛等，其复方制剂可用于临床治疗急慢性肝炎[1-2]。有研究表明，三叶香茶菜乙醇提取物具有保肝、降酶活性，其主要药效成分为齐墩果酸和熊果酸[3-4]。另有研究发现，三叶香茶菜的多种苯基木脂素成分可减少小鼠巨噬细胞RAW264.7 的炎性损伤，可能是其药效成分之一[5]。动物实验表明，三叶香茶菜能减轻四氯化碳致大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis，HF)程度，下调Toll 样受体4(Tolllike receptor 4，TLR4)、核因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)、磷酸化核因子κB 抑制蛋白(phosphorylated inhibitor of NF-κB，p-IκB)、NOD 样受体蛋白3(NODlike receptor protein 3，NLRP3)的表达，减少白细胞介素1β(interleukin-1β，IL-1β)、IL-18、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)等炎症因子的释放，提示其可通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3 通路来减轻大鼠的炎性损伤，从而发挥抗HF 作用[6-7]。有研究指出，NLRP3炎症小体可诱导肝细胞死亡，并可在细胞外被肝星状细胞吞噬，从而激活肝星状细胞，使得IL-1β、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)分泌上调，进而加重HF[8]，提示肝星状细胞和肝细胞所构成的肝脏微环境在HF的发展过程中发挥了重要作用。基于此，本研究在前期体内实验的基础上，以TLR4/NF-κB/NLRP3通路为切入点，探讨三叶香茶菜提取物对肝星状细胞和肝细胞的影响，进一步揭示其抗HF的分子机制。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括CC-170T-8型三气培养箱(新加坡ESCO 公司)、FilterMax F3 型多功能酶标仪[美谷分子仪器(上海)公司]、FC-1100型超微量核酸检测仪(杭州遂真生物技术有限公司)、AriaMx型实时聚合酶链反应(real-time PCR)系统(美国Agilent 公司)、Tanon 5200型凝胶成像系统(上海天能科技有限公司)等 ......