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柴胡陷胸汤含药血清对高脂血清致人脐静脉内皮细胞损伤的影响及机制Δ
http://www.100md.com 2022年10月31日 中国药房 2022年第20期
高浓度,1材料,1主要仪器,2主要药品与试剂,3实验动物与细胞,2方法,1柴胡陷胸汤的制备,2正常血清和高脂血清的制备,3柴胡陷胸汤含药血清的制备,4细胞分组与处理,5细胞增殖能力的检测,6细胞
     王建湘,廖 杨,易 琼,陈新宇(.湖南中医药大学第一附属医院重症医学科,长沙 40007;.湖南中医药大学研究生院,长沙 4008;3.湖南中医药大学第一附属医院心血管内科,长沙 40007)

    冠心病心绞痛是一种临床常见疾病,由动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)和冠状动脉功能改变(痉挛)引起,其发病率和病死率呈逐年上升趋势,严重危害人民生命健康[1-2]。柴胡陷胸汤由小柴胡汤和小陷胸汤二方加减而成,组方药材包括柴胡、法半夏、黄芩、黄连、瓜蒌、木香、九香虫、丹参、甘草。该方可减轻冠心病心绞痛患者疼痛发作次数、程度,并缩短疼痛持续时间[3],但其作用机制尚不明确。

    血管内皮功能障碍与冠心病心绞痛的发生、发展密切相关,炎症和血脂异常则是导致该疾病进展的重要因素[4-5]。据报道,冠心病心绞痛患者存在明显的血脂高、血管损伤和炎症因子表达异常等症状[6-7],且Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)通路被激活[8];而抑制TLR4/NF-κB 炎症通路的过度活化可减轻血管炎症和AS,并改善血脂水平[9]。有研究指出,柴胡陷胸汤中的多种中药及其主要成分均具有降血脂、抗炎、保护血管内皮细胞的作用,并可抑制TLR4/NF-κB 炎症通路的活化[10-12],但该方对冠心病心绞痛的保护作用是否与改善血管内皮功能障碍、抑制炎症反应有关尚未见报道。

    中药血清药理研究方法是近年来倍受学界关注的中药体外药理实验研究方法,以含药血清进行体外实验可排除中药复方及粗提物成分、电解性能、渗透压、酸碱度等因素的影响,并与药物在体内发挥药理学效应的真实过程较为接近,故可准确、真实地反映中药的整体作用及潜在机制。基于此,本研究拟采用高脂血清诱导内皮细胞损伤,探究柴胡陷胸汤含药血清对血管内皮细胞损伤的影响,旨在为阐明其治疗冠心病心绞痛的作用机制提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括Modular P800 型全自动生化分析仪(瑞士Roche公司),HERAcell 240i型CO2细胞培养箱(美国Thermo Fisher Scientific公司),iMark680型多功能酶标仪、蛋白转膜装置(电泳仪、转膜槽)、Quantity One-v 4.6.2型凝胶图像分析软件(美国Bio-Rad公司),ABI Prism?7300 型荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪(美国ABI公司)等 ......

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