王韵旨，郭 丽，吴作敏，宁 萌，应真真，金少举，于晓涛，王 瑞#(.漯河市第一人民医院药学部/河南省中药制剂与加工中医药重点实验室/河南省中药制剂现代化技术研发与临床应用工程研究中心，河南漯河46000；.漯河医学高等专科学校药学系，河南漯河 4600)

    归芪通脉合剂由黄芪、当归、川芎、红花、赤芍、党参、桃仁、白术、陈皮、茯苓、甘草、地龙、僵蚕、蜈蚣14味中药组成，由经典名方“补阳还五汤”加减而成，全方以活血行气药为主，辅以通经活络之品，具有活血通络、行气化瘀的功效，主要用于缺血性脑卒中恢复期气虚血瘀证的临床治疗，对手足不遂、肢体麻木、舌强语蹇等症状的缓解效果较好[1]。

    本课题组前期对归芪通脉合剂的提取工艺进行了优化，并建立了黄芪甲苷和羟甲基红花黄色素A的含量测定方法[1]。该药的现行质量标准除对制剂性状、装量、密度、pH值和微生物限度进行规定外，仅要求采用薄层色谱法对制剂中的党参、赤芍和黄芪进行定性鉴别[2]，且尚未见归芪通脉合剂质量控制的相关研究报道。由于中药复方制剂疗效的发挥是多种化学成分共同作用的结果，故药材的薄层鉴别和单个或数个成分的含量测定无法充分反映归芪通脉合剂的整体质量[3]。

    指纹图谱结合化学模式识别可实现对中药饮片及其制剂整体质量的全面分析。中药指纹图谱技术能较充分地提取中药及其复方制剂色谱图中的化学成分信息，具有信息量大，专属性、整体性和模糊性强的特点，是目前中药制剂分析的常用方法之一[4]。化学模式识别技术可分为两类：一类是无监督的分析方法，包括层次聚类分析(hierarchical cluster analysis，HCA)和主成分分析(principle component analysis，PCA)等；另一类是有监督的分析方法，包括偏最小二乘法-判别分析和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squarediscriminate analysis，OPLS-DA)，上述方法可通过对指纹图谱中的多维数据信息进行分类、降维等处理，筛选出其中的质量差异标志物，从而客观、系统、全面地分析中药及其复方制剂的整体质量，并为其质量控制提供依据[5]。基于此，本研究拟建立归芪通脉合剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱，同时结合化学模式识别技术全面、系统地评价该药的质量，旨在为后续的质量控制、药效学和作用机制研究提供参考，为相关中药新药的开发提供依据。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有LC-20AD 型HPLC 仪、AUW-120D 型十万分之一电子天平(日本Shimadzu 公司) ......