人参-茯苓药对抗衰老活性条件筛选及机制研究Δ
单药,空白对照,1材料,1主要仪器,2主要药品与试剂,3菌种,2方法,1人参-茯苓药对提取物的制备,2酿酒酵母的培养及生长曲线绘制,3人参-茯苓药对最佳配伍比例和给药条件的筛选,4酿酒酵母细胞内抗氧化酶活性及ROS
白竹林,赵大庆,陈静静,曾婧,白雪媛,王思明(长春中医药大学吉林省人参科学研究院,长春 130117)衰老是生物体正常的生理过程,其受体内外多种因素(环境因素、心理因素、遗传因素等)的影响,涉及全身多个器官和系统。根据2020年全国人口普查结果,中国60岁及以上老人有26 402万人,占总人口的18.70%,比十年前的数据增加了5.44%[1],提示中国人口老龄化进程进一步深化。随着老龄化问题的日益严重,越来越多的学者开始关注抗衰老研究。
目前,用于研究衰老的模型十分广泛,从简单的单细胞生物到复杂的哺乳动物均有所应用,如酿酒酵母、线虫、果蝇、鼠等[2]。酿酒酵母是抗衰老研究中最简单的生物模型,其衰老代谢反应机制与人体细胞非常相似[3],生长周期短且易于培养,可进行高通量药物活性筛选[4]。基于上述优点,酿酒酵母已被广泛用作研究衰老的模式生物。
中医学认为,衰老是指随着年龄的增长,人体阳气下降,气血不足,内脏功能下降,气血阴阳失衡。中医衰老学说包括肾虚衰老说、脾胃虚弱衰老说、气虚血瘀衰老说等[5]。根据中医古籍记载,人参-茯苓药对是一种常用的配伍组合,在古代抗衰老方剂中,人参和茯苓配伍的比例排在第1位,二者配伍组合出现了146次[6—7]。《神农本草经》记载“人参主补五脏,久服轻身延年”[8]。研究表明,茯苓具有安魂、养神、延年的作用[9]。目前关于人参、茯苓二者配伍抗衰老的相关研究较少,且作用机制尚不明确。基于此,本研究以酿酒酵母为衰老模型生物,筛选人参-茯苓药对抗衰老的最佳配伍比例、给药浓度和给药时间点,通过测定抗氧化酶活性,活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),以及氧化应激与能量代谢相关基因mRNA表达水平,初探人参-茯苓药对抗衰老作用机制,以期为人参-茯苓药对治疗由衰老导致的疾病提供实验参考。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器有innova40型全温振荡培养箱、Eppendorf AG型高速离心机(德国Eppendorf公司),AB135-S型电子天平(瑞士Mettler Toledo公司),infinite M200PRO型酶标仪(瑞士TECAN公司),SCIENTZ型超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司) ......
您现在查看是摘要页,全文长 15125 字符。