靳潇潇，李卫胜，杨雄，郑聪，何文强 (河南中医药大学第一附属医院泌尿外科二区，郑州 450003)

    肾结石是泌尿系统常见疾病之一，由于生活环境的变化及饮食结构的改善，肾结石患病率呈上升趋势[1]。我国最近一项调查研究显示，肾结石患病率为5.8%(男性为6.5%，女性为5.1%)，即每17人中就有1人患肾结石[2]。越来越多的证据表明，炎症、氧化和抗氧化失衡可能在肾结石的发展中起关键作用[3―5]。去乙酰化酶3(SIRT3)是存在于线粒体内的一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的去乙酰化酶，主要调节线粒体功能和相关代谢，可反映能量限制和应激状态；叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在线粒体内主要受SITR3的调控，可保护机体免受氧化应激损伤[6]。

    中医范畴内肾结石属“石淋”“尿淋”“砂淋”等，主要是由于肾虚，膀胱气化不足，湿热蕴结与下焦，气滞血瘀而炼液成石[7]，其治疗方式兼顾扶正祛邪、益气补肾、清热通淋[8]。石淋清颗粒主要由金钱草、海金沙、石韦、王不留行等组成，是河南中医药大学第一附属医院的自拟方，临床上主要用于促进泌尿系统结石患者排石，可缓解疼痛，缩短排石时间。为进一步了解石淋清颗粒的作用机制，本研究建立草酸钙肾结石大鼠模型，并以SIRT3/FOXO3a信号通路为靶点探讨石淋清颗粒预防肾结石形成的作用机制，以期为其临床应用提供实验基础。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    1.2 主要药品与试剂

    石淋清颗粒由河南中医药大学第一附属医院药剂科提供；Von Kossa染色试剂盒(批号G1043)购自武汉赛维尔生物科技有限公司；苏木素-伊红(HE)染色试剂盒(货号G11120)购自北京索莱宝科技有限公司；活性氧(reactive oxygen species，ROS)试剂盒、丙二醛(malondi‐aldehyde，MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)试剂盒(货号分别为E004-1-1、A003-1、A001-1)均购自南京建成生物工程研究所；骨桥蛋白(os‐teopontin，OPN)试剂盒(批号20211026R)购自江苏酶免实业有限公司；SIRT3抑制剂(批号GC19013)购自美国Glpbio公司；兔抗大鼠SIRT3多克隆抗体(批号2627S)购自美国CST公司；兔抗大鼠FOXO3a多克隆抗体、兔抗大鼠SOD2多克隆抗体(批号分别为66428、24127)购自武汉三鹰生物技术有限公司。本研究所用引物均由武汉赛维尔生物科技有限公司设计合成 ......