马丽亚 ，杜婧雯 ，张童 ，俎兆轩 ，郭申 ，赵绅 ，张明昊 (1.河南中医药大学教务处，郑州 450008；.河南中医药大学医学院，郑州 450046)

    多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)是以月经失调、慢性无排卵、雄激素升高及卵巢多囊样改变为主要表现的一种妇科疾病，常伴发生殖功能障碍、胰岛素抵抗等代谢异常症状，亦可增加心血管疾病、子宫内膜癌的患病风险[1]。目前，西医治疗多以激素替代、调经及促排卵为主，患者妊娠率低，且可出现子宫异常出血、胃肠道不适、肝功能损害及肥胖等多种副作用[2―3]。中医将 PCOS 归为“不孕症”“闭经”“月经过少”“月经后期”“癥瘕”范畴，认为其病机是肾虚，继发肝瘀、脾虚、痰饮、水湿互结[4―5]，故应从补益脾肾入手进行治疗[6]。金匮肾气丸始载于《金匮要略》，乃“千古补肾之组方”，其对妇科疾病的治疗论述最早见于《妇人杂病脉证并治第二十二》，具有温补肾阳、化气行水的功效，且已有治疗PCOS的临床报道[7]，但此方面实验研究较少，作用机制亦不明确。目前，相关研究发现，金匮肾气丸可改善糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗[8]，其中肝激酶B1(liver kinase B1，LKB1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)信号通路与胰岛素抵抗密切相关[9]，但是金匮肾气丸是否可通过LKB1/AMPK信号通路改善POCS尚不明确。基于此，本研究选择炔雌醇环丙孕酮片(商品名为达英-35，以下简称“达英-35”)联合二甲双胍为阳性对照药物[9―10]，探讨金匮肾气丸对胰岛素抵抗、性激素水平、卵巢病理形态变化及LKB1/AMPK信号通路的影响，以期为金匮肾气丸治疗PCOS提供实验依据。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有BS110S型电子天平(北京塞多利斯天平公司)、MR-96TB型酶标仪[骋克仪器(上海)有限公司]、RM2235石蜡切片机(德国Leica公司)、D3024R型台式高速冷冻型微量离心机[大龙兴创实验仪器(北京)股份有限公司]、CX23型光学显微镜(日本Olympus公司)、Stepone plus型荧光定量PCR仪(美国ABI公司)。

    1.2 主要药品与试剂

    金匮肾气丸购自北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂(批号19032632，规格0.2 g/粒)；达英-35购自德国拜耳医药保健有限公司(批号KT062FL2，规格0.2 mg/片)；盐酸二甲双胍片购自上海寿如松药业泌阳制药有限公司(批号20031702 ......