平肝活血散对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及作用机制初探Δ
皮层,1材料,1主要仪器,2药品与试剂,3动物,2方法,1造模,2分组与给药,3检测指标,4统计学方法,3结果,1大鼠神经功能评分,2大鼠脑梗死情况,3大鼠神经元损伤情况,4大鼠神经元凋亡情况,5大鼠脑缺
宋发萍,张洁,唐勇,刘宗梅,王晓玲(.陕西中医药大学第一临床医学院,陕西 咸阳 7000;.安康市中医医院脑病科,陕西 安康 75000)缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)约占卒中总人数的80%,是世界第二大死亡原因和第三大致残原因[1]。时间窗内静脉溶栓和动脉取栓是IS急性期的有效治疗手段[2]。脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemiareperfusion injury,CIRI)是IS预后不良的重要因素。细胞凋亡在CIRI病理进程中发挥着重要作用,受p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3等基因的调控,已有研究证实抑制细胞凋亡可减轻CIRI,保护神经功能[3]。
平肝活血散是陕西省名中医王晓玲教授治疗卒中的经验方,由天麻15 g、赤芍12 g、三七6 g、益母草15 g、竹茹10 g组成,具有平肝熄风、活血化瘀、清热化痰之功。前期研究证实,该方能促进脑出血患者脑水肿消退,改善超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子表达[4-5]。方中主药在CIRI中发挥神经保护作用,可有效抑制神经元凋亡[6-7],但其作用机制尚不明确。为此本研究考察了平肝活血散对大鼠CIRI的影响,初探其作用机制,旨在为明确平肝活血散治疗CIRI的作用机制提供参考。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器包括TB-718EL型组织包埋机(湖北泰维科技实业股份有限公司)、Nikon Eclipse E100型显微镜(日本Nikon公司)、RT-6100型酶标仪(美国Rayto公司)、D3024R型台式高速冷冻离心机[大龙兴创实验仪器(北京)有限公司]、Mini-PROTEAN Tetra型电泳仪(美国Bio-Rad公司)、Odyssey型双色红外荧光成像系统(美国Li-Cor公司)等。
1.2 药品与试剂
平肝活血散配方颗粒剂(批号分别为0052263、0060273、0041413、8111413、0095043,剂量与平肝活血散剂量等效)购自广东一方制药有限公司;通心络胶囊(批号219980015,规格0.26 g/粒)购自石家庄以岭药业股份有限公司;4%多聚甲醛溶液(批号AR1068)购自武汉博士德生物工程有限公司;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)试剂(批号DY30104-10g)购自上海迪医明生物科技有限公司;尼氏染液(批号G1036)、TUNEL试剂盒(批号G1507)、BCA蛋白定量检测试剂盒(批号G2026)、聚偏二氟乙烯膜(批号G6015)均购自武汉赛维尔生物科技有限公司;小鼠β-肌动蛋白(β-actin)单克隆抗体(批号8227)、兔抗抑癌p53单克隆抗体(批号33889)、兔抗B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2 ......
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