万安平 ，张婧 ，周雄 ，冯育林 ，刘骏 ，何瑶 ， ，李翔 (.江西中医药大学中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，南昌 330006；.江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室，南昌 330004)

    白头翁始载于《神农本草经》，为毛茛科植物白头翁Pulsatilla chinensis(Bunge) Regel的干燥根[1]。白头翁皂苷B4(anemoside B4，AB4)是白头翁中的五环三萜皂苷成分之一，具有抗肿瘤、调节免疫等药理作用[2]。然而AB4为水溶性药物，在血浆中的半衰期短、代谢快，在肿瘤部位的富集量较少，这在一定程度上限制了其应用[3]。程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1，PD-L1)是一种在肿瘤表面大量表达的免疫抑制分子，阻断免疫检查点PD-L1/程序性死亡蛋白1(programmed death-1，PD-1)可以抑制癌细胞的激活，进而提高肿瘤免疫治疗的效应[4]。小干扰RNA(small interference RNA，siRNA)是一种长度为21～25 bp的双链RNA，其可通过RNA干扰作用沉默相关基因来达到治疗疾病的作用[5]。PD-L1 siRNA(简称为“siP”)可通过诱导内源性mRNA降解来下调肿瘤细胞中PD-L1的水平，从而激活T淋巴细胞的抗肿瘤免疫活性[6]。但是游离siP的稳定性差，难以穿透生物屏障，且靶向递送效率低[7]。因此，设计一种可实现靶向递送siP的有效载体具有重要意义。

    脂质体是目前研究最多、应用最广的递送系统，可改善药物的稳定性[8]。将AB4和siP共同包载于脂质体囊泡中，有望延长其在体内的循环时间，从而提高其在肿瘤组织的分布。环精氨酰甘氨酸天冬氨酸序列[cyclo(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Cys)，cRGD]是一种可与αβ整合素受体结合的环肽[9]，而αvβ3整合素受体在非小细胞肺癌的肿瘤组织和肿瘤血管细胞表面高度表达[10]。因此，本研究首先将AB4和siP共装载于脂质体中，然后利用cRGD可与αvβ3整合素受体结合的优势，对脂质体进行修饰，制备AB4和siP共递送cRGD修饰靶向脂质体(AB4/siP-c-L)，以提高脂质体的肿瘤主动靶向性，为其后续抗肿瘤研究奠定基础。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用的主要仪器有Gallios型流式细胞仪(美国Beckman公司)，JEM-2100型高分辨率透射电子显微镜(日本Jeol公司)，Chemi Doc XRS型凝胶成像仪、Mini-Sub Cell GT Cell小型水平电泳槽(美国Bio-Rad公司) ......